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上海古朵生物科技有限公司
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細胞的 指紋 可以成為抵抗癌癥的武器 古朵新聞√2019/04/16
由里斯本InstitutodeMedicinaMolecularJo?oLoboAntunes(iMM)組織負責(zé)人NunoBarbosaMorais*的研究小組計算分析了數(shù)千種腫瘤中癌細胞“指紋”相關(guān)標(biāo)記基因的表達,并揭示了在抗擊癌癥方面的治療潛力。今天發(fā)表在PLoSComputationalBiology科學(xué)雜志上的研究顯示了這些基因活躍的腫瘤類型,并確定了具有選擇性消除帶有該標(biāo)記的細胞的潛力的藥物。中心體是存在于所有動物細胞中的細胞器,其在幾種細胞過程中是基礎(chǔ)的,例如細胞之間的分裂,遷移和通
古朵生物:維生素B12缺乏的危險!2019/04/08
使用蚯蚓是地球上簡單的動物之一,萊斯大學(xué)的生物科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了維生素B12過少的飲食和兩種可能致命的病原體感染風(fēng)險增加之間的個直接聯(lián)xi。盡管它們簡單,1毫米長的線蟲稱為秀麗隱桿線蟲(秀麗隱桿線蟲)與人類有著重要的限制:它們不能制造B12并且必須從它們的飲食中獲得所需的一切。在今天發(fā)表于PLOSGenetics的一項研究中,來自Rice生物化學(xué)家和癌癥研究員NatashaKirienko的研究人員描述了B12缺乏的飲食如何在細胞水平上損害秀麗隱桿線蟲的健康,降低了蠕蟲代謝支鏈氨基酸的能力酸(BCAA
化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型你知道多少?2019/04/04
化學(xué)發(fā)光是物質(zhì)在進行化學(xué)反應(yīng)過程中伴隨的一種光輻射現(xiàn)象,可以分為直接發(fā)光和間接發(fā)光。直接發(fā)光是簡單的化學(xué)發(fā)光反應(yīng),有兩個關(guān)鍵步驟組成:即激發(fā)和輻射。如A、B兩種物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)生成C物質(zhì),反應(yīng)釋放的能量被C物質(zhì)的分子吸收并躍遷至激發(fā)態(tài)C*,處于激發(fā)的C*在回到基態(tài)的過程中產(chǎn)生光輻射。這里C*是發(fā)光體,此過程中由于C直接參與反應(yīng),故稱直接化學(xué)發(fā)光。間接發(fā)光又稱能量轉(zhuǎn)移化學(xué)發(fā)光,它主要由三個步驟組成:首先反應(yīng)物A和B反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)中間體C*(能量給予體);當(dāng)C*分解時釋放出能量轉(zhuǎn)移給F(能量接受體)
古朵生物:細菌如何快速響應(yīng)外部環(huán)境變化?2019/03/28
近年來,抗生素濫用現(xiàn)象使耐藥菌日漸增多,這已經(jīng)成為了一個性的公共健康問題。面對環(huán)境變化,細菌能夠快速適應(yīng)并保持快速生長,這其中的機制是分子微生物學(xué)所面臨的主要挑戰(zhàn)之一。了解這一機制可以幫助人們理解細菌對抗生素產(chǎn)生抗性的原因。日前,來自瑞典烏普薩拉大學(xué)(UppsalaUniversity)的研究人員提出了一種細菌巧妙調(diào)節(jié)自身基因表達,快速適應(yīng)環(huán)境改變的模型。為了在不同環(huán)境中實現(xiàn)快速生長,細菌需要調(diào)整自己的酶水平,以便有效利用現(xiàn)有環(huán)境中的營養(yǎng)源。細菌自身的蛋白生產(chǎn),必須能夠有效適應(yīng)生活環(huán)境的快速變化
古朵生物:細胞抗衰老的原理是什么?2019/03/27
定義——由于身體細胞群在人的生命周期中*受到環(huán)境(內(nèi)、外)沖擊和傷害,引起身體各組織器官功能逐漸緩慢地退化,并導(dǎo)致許多身體功能喪失的一種綜合性疾病,也就是所謂的慢性病。這種病發(fā)源于你的成年期、在中年期“正式”患上,50歲以后明顯加重。1、細胞壽命有限,細胞會自然衰老2、新鮮細胞補充不足導(dǎo)致衰老細胞無法被替換及有效細胞總量下降3、外環(huán)境和基因的共同作用加速細胞老化4、體內(nèi)干細胞數(shù)量及活力均減少衰老的新定義*細胞抗衰老根本的途徑是修復(fù)細胞、改善細胞代謝、激活衰老細胞的功能”。只有及時對受損細胞、衰老
古朵生物:液體培養(yǎng)液中裂解感染實驗2019/03/19
實驗材料λgtll重組噬菌體大腸桿菌Y1090hsdR菌株試劑、試劑盒細胞裂解液IPTGMgS04?7H20苯j(luò)ia基磺酰氯SMLB培養(yǎng)液儀器、耗材SorvallSS-34轉(zhuǎn)子或同等產(chǎn)品沸水水浴液氮實驗步驟材料緩沖液劑及溶液貯存液,緩沖液及試劑的組分見附錄1。將貯存液稀釋至合適濃度。細胞裂解液(每個分析的噬斑需100ul)50mmol/LTris-Cl(pH6.8)100mmol/L二硫蘇糖酵2%(m/V)SDS0.1%(m/V)溴酚藍10%(V/V)甘油IPTG(1mol/L)(每個分析的噬斑
古朵生物:多藥抗藥基因的表達實驗2019/03/12
實驗方法原理大多MDR細胞膜上出現(xiàn)MDR-1基因及其基因產(chǎn)物P-糖蛋白過度表達。多藥抗藥基因的表達實驗是通過反轉(zhuǎn)錄和PCR的方法來檢測這些特定基因的過度表達。實驗材料RNA試劑、試劑盒PBSlu仿異丙醇萘酸異硫氰酸肽十二烷基肌酸鈉構(gòu)櫞酸鈉乙酸鈉二疏基乙醇乙醇Taq酶儀器、耗材離心機紫外分光光度計瓊脂糖凝膠電泳PCR儀實驗步驟一、細胞總RNA提取1.收集約5x107個細胞,冷PBS洗滌。2.加入400ulRNA提取液(含6mol/l的異硫氰酸肽,0.5%十二烷基肌酸鈉,0.025mol/l構(gòu)櫞酸鈉
動物細胞培養(yǎng)需要準(zhǔn)備的內(nèi)容有哪些2019/03/11
*更好的準(zhǔn)備事項能夠讓科研和生物的生長和研究擁有更好的環(huán)境,特別是在動物細胞培養(yǎng)時更需要對細胞生物學(xué)的實驗基礎(chǔ)做好維護,通過各種專業(yè)的技術(shù)和環(huán)境的保障,讓這種動物細胞培養(yǎng)擁有更好的生長環(huán)境,而在動物細胞培養(yǎng)之前,相關(guān)科研人員也必須要準(zhǔn)備如下幾大內(nèi)容。其一,選擇可靠的血清原材料。*血清是細胞培養(yǎng)液之中重要的組成成分,而其自身的品質(zhì)直接決定了這種動物細胞培養(yǎng)的效率和生長情況,想要營造更好的動物細胞培養(yǎng)環(huán)境更需要對這種原材料進行了解和分析,服務(wù)yi流的動物細胞培養(yǎng)需要對細胞生長環(huán)境之中的有效因子和營養(yǎng)
細胞培養(yǎng)常遇到的問題都在這了2019/03/04
養(yǎng)細胞是一件戳心戳肺的事。你要像照顧小孩一樣仔細對待,愛護她,呵護她。上篇提到細胞培養(yǎng)的注意事項,反響熱烈,這次就來講講細胞培養(yǎng)常見問題的原因及對策。1培養(yǎng)液pH值變化太快原因CO2張力不對培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足培養(yǎng)液中鹽濃度不正確細菌、酵母或真菌污染對策按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5%到10%。或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液松開瓶蓋1/4圈加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度在CO2培
實驗說明:大腸桿菌轉(zhuǎn)化實驗以及原理2019/02/26
一、原理質(zhì)粒DNA粘附在細菌細胞表面,經(jīng)過42°C短時間的熱擊處理,促進吸收DNA.然后在非選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)一代,待質(zhì)粒上所帶的抗菌素基因表達,就可以在含抗菌素的培養(yǎng)基中生長。二、器材旋渦混合器,微量移液取樣器,移液器吸頭,1.5ml微量離心管,雙面微量離心管架,干式恒溫氣?。ɑ蚝銣厮″仯票鶛C,恒溫搖床,培養(yǎng)皿(已鋪好固體LB-Amp),超凈工作臺,酒精燈,玻璃涂棒,恒溫培養(yǎng)箱。三、試劑培養(yǎng)基(不加抗菌素),LB培養(yǎng)基(加抗菌素),無菌ddH2O,IPTG,X-gal.四、實驗準(zhǔn)備無菌dd
細胞株培養(yǎng)過程中常見的問題有哪些呢?2019/02/18
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。然而,細胞株在體外培養(yǎng)的過程中會出現(xiàn)一些問題,比如:細胞株無法在培養(yǎng)皿上貼壁生長,細胞株生長緩慢,細胞株死亡等。那么該如何解決呢?一、細胞株無法在培養(yǎng)器皿上貼壁生長1.細胞株胰酶消化過度:縮短胰酶消化時間或減少胰酶用量。2.支原體污染:隔離細胞株,檢測是否感染支原體;清洗通風(fēng)廚和培養(yǎng)箱,如細胞株被污染,滅菌處理后丟棄。3.培養(yǎng)基中無附著因子:如果使用的是無血清配方,應(yīng)確保含有附著
古朵生物:Folin-酚試劑配制過程2019/01/23
方法:試劑試劑甲:A液:Na2CO310.00gNaOH2.00g酒石酸鉀鈉(或鉀鹽鈉鹽)0.25g混合、溶于500ml蒸餾水中。B液:CuSO4·5H2O0.5gH2O100.00ml用前將A液50份與B液1份混合即為試劑甲。試劑乙:于磨口回流瓶加入下列試劑Na2WO4·2H2O100.00gNaMoO4·2H2O25.00gH2O700.00ml85%H3PO450.00ml濃HCl100.00ml按上回流冷凝管以小火回流10h后再加:硫酸鋰150.00gH2O50.00ml溴水?dāng)?shù)滴開口繼續(xù)
化學(xué)試劑的分類 包裝及其取用方法2019/01/16
一、試劑的分級根據(jù)化學(xué)試劑的純度,按雜質(zhì)含量的多少,國內(nèi)將化學(xué)試劑分為四級:一級試劑(優(yōu)級純試劑)通常用G.R表示。二級試劑(分析純試劑)通常用A.R表示。三級試劑(化學(xué)純)通常用C.P表示。四級試劑(實驗或工業(yè)試劑)通常用L.R表示。此外,根據(jù)特殊的工作目的,還有一些特殊的純度標(biāo)準(zhǔn)。例如光譜純、螢光純、半導(dǎo)體純等。取用時應(yīng)按不同的實驗要求選用不同規(guī)格的試劑。例如一般無機實驗用三級或四級試劑即可,分析實驗則需取用純度較高的二級甚至一級試劑。二、試劑的包裝固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試
你見過免疫細胞和腫瘤細胞之間的激戰(zhàn)嗎?2019/01/16
如今炙手可熱的PD-1,CAR-T,TCR-T技術(shù)等都要歸功于這一偉大發(fā)現(xiàn)及其臨床應(yīng)用。如果你的工作也和免疫療法相關(guān),是不是像小編一樣也有一丟丟自豪,感覺自己參與見證了人類疾病*的一次飛躍呢?無論名字多么fancy的療法,有沒有用還是得看它能否消滅腫瘤細胞。在體外實驗中,抗體或經(jīng)改造的免疫細胞(效應(yīng)細胞)對腫瘤細胞(靶細胞)的殺傷是評估療法效價的*的評判標(biāo)準(zhǔn)之一。多年來,科學(xué)家們已開發(fā)出了多種免疫細胞殺傷的檢測方法,小編總結(jié)如下:這些方法原理不同,也各有利弊。比如許多實驗室常用的乳酸脫氫酶(LD
冷凍切片的方法及注意事項2019/01/08
一、實驗前準(zhǔn)備1、清理實驗臺及儀器2、開啟冷凍切片機并將冷凍切片機預(yù)降至所需溫度(-15~-20℃)3、準(zhǔn)備好處理好的載玻片、刀片、膠水以及藥品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鮮組織,用干紗布或濾紙擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形狀不一的空泡,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)移位。注:取材中目的標(biāo)本既要明確也要確保其結(jié)構(gòu)的完整性,應(yīng)避免不必要的脂肪及壞死組織附著;要盡量剔除毛發(fā)、硬骨或鈣化物;保乳手術(shù)切緣由于脂肪組織較多,取材厚度不要超過3mm,厚者冰凍費時,大者難以切完
古朵生物:如何選擇正確的抗體?2019/01/02
抗體是我們實驗中常用到的檢測試劑,如果實驗室中有驗證好的抗體,可以直接拿來用,是一件非常幸福的事情。可如果要做到新的檢測,面對各種抗體,要如何選出你的Ab.Right呢?下面就容小編為你慢慢道來??贵w,也就是免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig),是由兩條約50kDa的重鏈和兩條25kDa的輕鏈通過疏水鍵和二硫鍵的鏈接而構(gòu)成,通過重鏈和輕鏈的N端的可變區(qū)來識別抗原表位(epitope)??乖砦豢梢允沁B續(xù)的氨基酸所構(gòu)成的線性表位,也可以是蛋白質(zhì)折疊后氨基酸序列不連續(xù)但空間接近的構(gòu)象表位
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在質(zhì)量監(jiān)控中有什么作用?2018/12/29
我國原地礦部于1978年制定了區(qū)域化探全國掃面計劃,在這項計劃中要在我國內(nèi)地及沿海二百多萬平方公里的山區(qū)及丘陵地區(qū)按若干平方公里采取一個樣來進行地球化學(xué)掃面以探明礦產(chǎn)資源情況。此項工作由各省地礦局中心實驗室組織。為防止過去曾出現(xiàn)的地區(qū)之間和省際之間圖幅拼接出現(xiàn)臺階產(chǎn)生偏倚,國家組織研制了水系沉積物(12種)、土壤(8種)、巖石(10種)、金(7種)等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并在化探掃面工作中在全面范圍內(nèi)統(tǒng)一采用密碼插入這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行質(zhì)量監(jiān)控,有效地控制了不同時間、不同方法及不同實驗室間的測試偏倚,使得此項工
土壤DNA 純化難點——腐殖質(zhì)2018/12/26
土壤,是由一層層厚度各異的礦物質(zhì)成分所組成大自然主體。土壤和母質(zhì)層的區(qū)別表現(xiàn)在于形態(tài)、物理特性、化學(xué)特性以及礦物學(xué)特性等方面。由于地殼、水蒸氣、大氣和生物圈的相互作用,土層有別于母質(zhì)層。它是礦物和有機物的混合組成部分,存在著固體,氣體和液體狀態(tài)。疏松的土壤微粒組合起來,形成充滿間隙的土壤的形式。這些孔隙中含有溶解溶液(液體)和空氣(氣體),因此,土壤通常被視為有多種狀態(tài)。提取土壤中微生物、動植物等的DNA是在分子水平上研究生態(tài)、環(huán)境保護與修復(fù)及菌種篩選等的基礎(chǔ)。土壤的成分包括礦物質(zhì)、粘土等無機物
SDS-PAGE的主要應(yīng)用有哪些?2018/12/24
SDS-Page因易于操作,而具有廣泛的用途,是許多研究領(lǐng)域的重要的分析技術(shù)。1.蛋白質(zhì)純度分析;2.蛋白質(zhì)分析量的測定,根據(jù)遷移率大小測定蛋白質(zhì)亞基的分子量;3.蛋白質(zhì)濃度的測定;4.蛋白質(zhì)水解的分析;5.免疫沉淀蛋白的鑒定;6.免疫印跡的步;7.蛋白質(zhì)修飾的鑒定;8.分離和濃縮用于產(chǎn)生抗體的抗原;9.分離放射性標(biāo)記的蛋白質(zhì);10.顯示小分子多肽。SDS-PAGE有效分離范圍取決于聚丙烯酰胺的濃度和交聯(lián)度,其孔徑隨著雙丙烯酰胺與丙烯酰胺比率的增加而減小,比率接近于1:20時,孔徑達到小值。分子
CRISPR/Cas9 技術(shù),熱度背后的冷思考2018/12/20
近年來,CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)正在給整個科研界帶來革命性變化,該技術(shù)使用CRISPR系統(tǒng)將Cas9蛋白和向?qū)NA注入小鼠受精卵,就能輕松實現(xiàn)基因敲除,同時,注入DonorDNA則可實現(xiàn)基因敲入,甚至學(xué)術(shù)期刊GenomeBiology有文章指出這項新技術(shù)將很快取代使用胚胎干細胞的基因修飾,看起來小鼠胚胎干細胞基因修飾技術(shù)的終結(jié)不可避免。然而,事實是這樣嗎?脫靶效應(yīng)仍存爭議CRISPR/Cas9這一被稱為“魔剪”的基因編輯工具在基因工程應(yīng)用方面被寄予厚望。但是,脫靶效應(yīng)這一有爭議的老問
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