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上海古朵生物科技有限公司
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古朵生物：酸性還是堿性？你的大腦pH值是多少？2020/03/20
許多技術(shù)能跟蹤大腦pH值改變，但你很難清楚大腦的精確pH值是多少?，F(xiàn)在，日本科學(xué)家開發(fā)了一種新方法，開拓了這方面的先河。岡崎國立生li科學(xué)研究所（NationalInstituteforphysicalSciences）和豐橋大學(xué)本月發(fā)表在《NatureCommunications》的一項研究，展示了一種測量大腦pH值的探針，與先前的技術(shù)相比，其時空精度有所提高。zui近一些研究發(fā)現(xiàn)pH值也會影響神經(jīng)傳遞，也就是說，pH變化可能對正常腦功能和病理性腦狀況有重要影響。然而，現(xiàn)有的測量腦pH值的方法
皮膚細(xì)胞如何有組織地走向死亡 @古朵新聞2020/03/19
皮膚的表皮由一層來自內(nèi)部的干細(xì)胞組成，這些干細(xì)胞周期性地停止分裂向身體表面外移動。當(dāng)細(xì)胞穿過隨后的幾層時，它們面臨的環(huán)境（比如溫度變化）越來越嚴(yán)酷，當(dāng)接近表面時，細(xì)胞核和細(xì)胞器突然消失，細(xì)胞向鱗片化戲劇化轉(zhuǎn)變。RebeccaC.Lancefield教授說：“我們確定了一種允許皮膚干細(xì)胞感知環(huán)境新變化，并迅速部署指令推動鱗片形成的機(jī)制?！盧ebeccaC.Lancefield實(shí)驗(yàn)室的前博士后研究員FelipeGarciaQuiroz發(fā)現(xiàn)了一些奇怪的現(xiàn)象：在皮膚細(xì)胞變成鱗片之前深色的蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，
古朵新聞：如何讓癌細(xì)胞中的miRNAs恢復(fù)正常2020/03/16
研究證實(shí)，miRNAs通過同時調(diào)控一組基因的表達(dá)編排了整個細(xì)胞程序。當(dāng)正常細(xì)胞彼此接觸時，一組特異的miRNAs會抑制促進(jìn)細(xì)胞生長的基因。而當(dāng)癌細(xì)胞中的粘附遭到破壞時，這些miRNAs錯誤調(diào)控，細(xì)胞生長失控。那么是否恢復(fù)癌細(xì)胞的正常miRNA水平，就可以逆轉(zhuǎn)這種異常的細(xì)胞生長？來自梅奧診所的研究人員發(fā)現(xiàn)了一種方法，可以幫助重編程癌細(xì)胞恢復(fù)正常，這一新研究發(fā)現(xiàn)揭示出了意想不到的新生物學(xué)，提供了關(guān)閉癌癥的密碼。這一研究成果公布在NatureCellBiology雜志上，由梅奧診所癌癥生物學(xué)系主任Pa
p16和細(xì)胞衰老會改善β細(xì)胞的主要功能2020/01/16
來自希伯來大學(xué)的博士后RonnyHelman，在IttaiBen-Porath博士以及YuvalDor教授等人發(fā)現(xiàn)，一個導(dǎo)致衰老的細(xì)胞程序，也可以給小鼠和人類的胰島素β細(xì)胞和胰島素生產(chǎn)，帶來意想不到的好處。這一發(fā)現(xiàn)公布在NatureMedicine雜志上。在這項研究中，研究人員檢測了一個名叫p16的基因的活性，已知該基因可激活細(xì)胞中一個稱為衰老的程序。衰老可阻止細(xì)胞分裂，因此對于癌癥的預(yù)防起重要作用。在衰老過程中，p16基因在人類和小鼠胰腺β細(xì)胞中的活性增加，并限制了它們分裂的潛能。這種活性被認(rèn)
為啥你的細(xì)胞這么矯情？不愿貼壁呢？2020/01/13
我們可能都有過這樣的經(jīng)歷：辛苦呵護(hù)的細(xì)胞，怎么也不愿意貼壁；貼壁了又很容易成塊或者成團(tuán)掉下來；原本貼壁的細(xì)胞，復(fù)蘇后細(xì)胞不貼壁了；........遇到這樣的問題你都如何解決？這次我們就來聊聊，為啥你的細(xì)胞為這么矯情，不愿貼壁呢？體外培養(yǎng)細(xì)胞貼壁與什么有關(guān)？首先并不是所有的細(xì)胞在體外培養(yǎng)的情況下都會貼壁，但大部分來自實(shí)體組織器官的細(xì)胞都會貼壁。貼壁的過程可能是這樣的：細(xì)胞首先分泌細(xì)胞外基質(zhì)，這種細(xì)胞外基質(zhì)黏附在支持物的表面（培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿的底面）。然后，細(xì)胞通過其表面表達(dá)的黏附因子與這些細(xì)胞外基質(zhì)
免疫沉淀技術(shù)的原理和抗體選擇 古朵新聞√2020/01/10
隨著生物技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)與基因之間的互作逐漸成為科研人員的關(guān)注熱點(diǎn)，染色免疫沉淀技術(shù)由此而生，并被應(yīng)用到各個科研領(lǐng)域當(dāng)中。本文聚焦染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)的原理、應(yīng)用和抗體選擇等問題，讓您對其有更全面的了解和認(rèn)識。隨著人類基因組測序工作的基本完成，功能基因組學(xué)的研究逐漸成為研究的熱點(diǎn)。而基因表達(dá)的調(diào)控又是功能基因組學(xué)的一個重要研究領(lǐng)域。研究某個蛋白因子的調(diào)控功能，可以通過對蛋白活性(激活或抑制其活性)，蛋白數(shù)量(過表達(dá)Overexpression或基因缺陷型Knockout),以及蛋白功能(功能缺陷
來自不同腦細(xì)胞的線粒體具有不同的蛋白質(zhì)2020/01/08
從小鼠小腦中兩種類型的神經(jīng)元和非神經(jīng)元星形膠質(zhì)細(xì)胞中分離出的細(xì)胞器中，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了不同水平的蛋白質(zhì)，暗示了功能上的差異。多年來，德國慕尼黑工業(yè)大學(xué)的神經(jīng)科學(xué)家ThomasMisgeld一直致力于在神經(jīng)退行性疾病和神經(jīng)炎性疾病的背景下研究線粒體。他了解到的一件事是，不同細(xì)胞或細(xì)胞類型甚至同一細(xì)胞不同部位的線粒體行為可能*不同。Misgeld說：“線粒體并不像我一直認(rèn)為的那樣統(tǒng)一?！彼腴_發(fā)一種工具來捕捉這種多樣性。華盛頓大學(xué)（UW）的研究人員開發(fā)了一種名為RiboTag的技術(shù)，該技術(shù)已有十年歷史
細(xì)胞怎么培養(yǎng)？看技術(shù)怎么說 古朵新聞√2020/01/06
細(xì)胞培養(yǎng)從原理上來說并不復(fù)雜，所需設(shè)備也比較簡單，但它仍是一份需要耐心的工作。針對不同細(xì)胞，培養(yǎng)時需根據(jù)細(xì)胞特性選擇不同的包被液，消化液等。對于培養(yǎng)貼壁能力較弱的細(xì)胞或原代細(xì)胞時，為了促進(jìn)細(xì)胞貼壁需要對培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等耗材進(jìn)行包被處理。目前sciencellzui主要的包被液有多聚賴氨酸(Poly-L-Lysine,Cat.#0403orCat.#0413)、牛血漿纖維粘連蛋白（BovinePlasmaFibronectin，Cat.#8248）、0.2％的明膠溶液（0.2%GelatinSol
轉(zhuǎn)錄組測序研究怎么做？全靠這些“套路”2020/01/02
全轉(zhuǎn)錄組這么火，怎么做？小編帶您一文參透全轉(zhuǎn)錄組測序的研究套路！一、什么是全轉(zhuǎn)錄組？全轉(zhuǎn)錄組是指特定組織或細(xì)胞在特定狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄出的所有轉(zhuǎn)錄本信息的總和，包含mRNA，smallRNA，lncRNA，circRNA等編碼和非編碼RNA。轉(zhuǎn)錄組學(xué)作為科學(xué)研究的基礎(chǔ)，其研究意義的重要性*。近年來，除了魅力不減當(dāng)年的miRNA、炙手可熱的lncRNA外，ceRNA分析也開始嶄露頭角，成為科研界的耀眼明星。二、為什么做全轉(zhuǎn)錄組測序？想解答這個問題，咱們先來聊聊什么是ceRNA。ceRNA(competin
古朵生物：聊聊支原體污染這個事兒2019/12/30
Q：zui近細(xì)胞狀態(tài)不好，細(xì)胞中有黑色小顆粒；但培養(yǎng)基清亮的，持續(xù)觀察一周沒有看到非常明顯的污染物，細(xì)胞也沒有死亡。那么是什么導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)每況愈下呢？A：很不幸，你可能是攤上支原體了......支原體是啥？支原體（mycoplasma）是目前發(fā)現(xiàn)的zui小的zui簡單的原核生物，能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖，由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。細(xì)胞為啥容易被支原體污染？1.支原體結(jié)構(gòu)簡單，多數(shù)呈球形，沒有細(xì)胞壁，只有三層結(jié)構(gòu)的細(xì)胞膜，故具有較大的可變性，直徑0.13-0.18um，可通過
古朵生物：流式分析的樣品制備需要注意這六點(diǎn)2019/12/27
近年來，隨著檢測參數(shù)越來越多，流式細(xì)胞儀也日漸普及。不過，盡管多個參數(shù)同時分析可帶來大量信息，但在樣品制備過程中必須采取適當(dāng)?shù)拇胧?，才能保證流式數(shù)據(jù)是相關(guān)的。如何才能少走彎路，下面聽聽各位專家的建議。1.從采集那一刻開始流式分析所用的樣品是十分多樣化的，從細(xì)胞、血液到組織等。這些需要不同的樣品采集和處理方法?！把夯蚪M織樣品通常在分析前幾天、幾周甚至幾個月采集，比如大型隊列研究，”美天旎的產(chǎn)品經(jīng)理JohannesFleischer解釋說，“若保存不當(dāng)，可能會影響結(jié)果。為了實(shí)現(xiàn)高度標(biāo)準(zhǔn)化，建議使用
近期大熱的單細(xì)胞核測序技術(shù) 古朵新聞√2019/12/25
不知不覺地，生物實(shí)驗(yàn)的規(guī)模正在逐漸變小，而通量正在逐漸變大。以往那些龐大的儀器正被手持設(shè)備或硅制芯片所取代，試劑的單位從毫升轉(zhuǎn)變?yōu)槲⑸蚣{升；而重復(fù)數(shù)量也從兩三個變?yōu)?6孔、384孔甚至1536孔。因此，實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)也從生物體轉(zhuǎn)換到組織再到細(xì)胞和細(xì)胞器，包括細(xì)胞核。從2011年開始，有關(guān)單細(xì)胞核測序的論文開始出現(xiàn)。通過谷ge學(xué)術(shù)檢索，*篇相關(guān)論文是2011年的一項腫瘤進(jìn)化研究，同年晚些時候還有一篇苔蘚基因靶向分析的研究發(fā)表。2012年，它被用于腫瘤的拷貝數(shù)變異分析。近兩年，單細(xì)胞核測序領(lǐng)域開始迅猛發(fā)
pUC18 和 pUC19質(zhì)粒圖譜 古朵新聞√2019/12/23
pUC18和pUC19質(zhì)粒圖譜pUC18和pUC19大小只有2686bp，是zui常用的質(zhì)粒載體，其結(jié)構(gòu)組成緊湊，幾乎不含多余的DNA片段，GenBank注冊號為L08752(pUC18)和X02514(pUC19)。由pBR322改造而來，其中l(wèi)acZ(MSC)來自M13mp18/19圖3-4是其質(zhì)粒圖譜。這兩個質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)幾乎是*一樣的，只是多克隆位點(diǎn)的排列方向相反。這些質(zhì)粒缺乏控制拷貝數(shù)的rop基因，因此其拷貝數(shù)達(dá)500-700。pUC系列載體含有一段lacZ蛋白氨基末端的部分編碼序列，在特
心得分享：如何查找特定基因序列2019/12/19
如何查找特定基因序列的心得與大家共享，下面以小鼠EDNRB基因?yàn)槔诱f明：1.查找一個基因的啟動子之前，是要對這個基因做一個初步的了解注意：在research下面選擇Gene在for后面輸入ednrb2.這個是查找結(jié)果，由于很多哺乳類動物都有該基因，查找結(jié)果顯示了很多五種的ednrb基因，我們選擇其中的Musmusculus這個是我們要找的小鼠種類，請大家正確選擇自己目標(biāo)基因的動物種類，Rattusnorvegicus是大鼠的學(xué)名，Musmusculus是小鼠的學(xué)名，由于我的目標(biāo)是小數(shù)的ednr
FISH操作中的常見問題及對策 古朵新聞√2019/12/16
FISH檢測要求使用中性福爾馬林（不恰當(dāng)?shù)膒H值會損傷DNA）固定24-48小時。固定時間不足會導(dǎo)致組織較軟，在預(yù)處理過程中會丟失部分組織和信號。固定時間過長導(dǎo)致組織變脆，不利于切片，也會導(dǎo)致大分子交聯(lián)情況嚴(yán)重，很難進(jìn)行消化。福爾馬林固定石蠟包埋的組織需要用蛋白酶進(jìn)行消化以去除多余的組織來暴露細(xì)胞。如果消化不足（酶濃度低、溫度不適合、時間太短），鏡下會出現(xiàn)云霧狀組織覆蓋在細(xì)胞上，無法觀測到暴露獨(dú)立的細(xì)胞核，從而降低雜交效率并很難選擇細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，這種情況需要重新制片。如果消化過度，則細(xì)胞核被損傷
傷口愈合/細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)新方法分享2019/12/12
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種操作簡單，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的研究細(xì)胞遷移的體外試驗(yàn)方法。這種方法的原理是，當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合?；镜牟襟E包括“劃痕”的制造，細(xì)胞遷移期間圖像的獲得以及后期數(shù)據(jù)的處理。優(yōu)點(diǎn)：1，在一定程度上模擬了體內(nèi)細(xì)胞遷移的過程。2,非常適合研究細(xì)胞與胞外基質(zhì)（ECM），細(xì)胞與細(xì)胞之間相互作用引起的細(xì)胞遷移。3，與包括活細(xì)胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容，可用于分析細(xì)胞間的相互作用。4，研究細(xì)胞遷移
幾種常用的蛋白標(biāo)簽的功能和優(yōu)點(diǎn) 古朵新聞√2019/12/09
重組蛋白表達(dá)技術(shù)現(xiàn)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個具體領(lǐng)域。特別是體內(nèi)功能研究和蛋白質(zhì)的大規(guī)模生產(chǎn)都需要應(yīng)用重組蛋白表達(dá)載體。美國GeneCopoeia的蛋白表達(dá)載體按照表達(dá)宿主的不同新推出3類，分別為表達(dá)宿主為大腸桿菌，哺乳動物細(xì)胞的，以及慢病毒載體，宿主可以為哺乳動物細(xì)胞和原代細(xì)胞。除了必要的復(fù)制和篩選的元件，協(xié)助表達(dá)和翻譯的元件外，本文將各類載體分別按照功能標(biāo)簽的不同確定種類并將個標(biāo)簽的功能初步介紹如下：His6：His6是指六個組氨酸殘基組成的融合標(biāo)簽，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個
古朵新聞：胞免疫的作用和應(yīng)用！2019/12/05
T細(xì)胞受到抗原刺激后，分化、增殖、轉(zhuǎn)化為致敏T細(xì)胞，當(dāng)相同抗原再次進(jìn)入機(jī)體，致敏T細(xì)胞對抗原的直接殺傷作用及致敏T細(xì)胞所釋放的淋巴因子的協(xié)同殺傷作用，統(tǒng)稱為細(xì)胞免疫。同體液免疫一樣，細(xì)胞免疫的產(chǎn)生也分為感應(yīng)、反應(yīng)和效應(yīng)三個階段。其作用機(jī)制包括兩個方面：⑴致敏T細(xì)胞的直接殺傷作用當(dāng)致敏T細(xì)胞與帶有相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞再次接觸時，兩者發(fā)生特異性結(jié)合，產(chǎn)生刺激作用，使靶細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變，引起靶細(xì)胞內(nèi)滲透壓改變，靶細(xì)胞腫脹、溶解以致死亡。致敏T細(xì)胞在殺傷靶細(xì)胞過程中，本身未受傷害，可重新攻擊其他靶細(xì)胞。
細(xì)菌蛋白質(zhì)抽取的方法步驟 古朵新聞√2019/12/04
1.儀器用具：（1）恒溫震蕩培養(yǎng)箱37℃；（2）高速冷凍離心機(jī)及離心管（使用20,000rpm離心陀）；（3）液態(tài)氮及冰筒；（4）37℃水浴鍋使用高速離心機(jī)要注意：離心機(jī)及離心陀的溫度要預(yù)冷*，相對位置的兩只離心管要平衡好，離心陀轉(zhuǎn)速不能超過zui高速限；2.藥品試劑：（1）轉(zhuǎn)型菌株pQG11/M15[pREP]單一菌落；（2）LB/amp/kan及IPTG（1Mstock）；（3）Lysisbuffer（50mMNa3PO4·12H2O,pH7.0;0.1MNaCl;0.1mMEDTA;0.2
你難道還在用質(zhì)粒做 CRISPR 基因編輯？2019/12/02
CRISPR-Cas9為基因工程領(lǐng)域打開了一扇嶄新的大門。這個相對簡單的分子生物學(xué)工具幾乎可以用來編輯任何基因組。CRISPR-Cas9復(fù)合物由可編碼的guideRNA(gRNA)和Cas9核酸酶組成，這兩種成分結(jié)合形成核糖核蛋白復(fù)合物（RNP），然后結(jié)合并切割目標(biāo)基因，再進(jìn)一步利用細(xì)胞的修復(fù)機(jī)制來實(shí)現(xiàn)基因組的編輯。在過去的幾年里，CRISPR-Cas9技術(shù)已經(jīng)被越來越多的研究人員所采用，并且在包括醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)和疾病控制等許多領(lǐng)域產(chǎn)生了重大影響。在設(shè)計CRISPR實(shí)驗(yàn)時，gRNA和Cas9的結(jié)構(gòu)是
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