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上海古朵生物科技有限公司
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13種單細胞RNA測序方法的比較 @古朵新聞2020/04/29
單細胞RNA測序（scRNA-seq）是鑒定樣本中單個細胞轉(zhuǎn)錄組的主流方法。為了確保人們在實驗過程中使用*方法，由西班牙國家基因組分析中心（CNAG-CRG）*的研究團隊對13種單細胞RNA測序方法開展了性能評估。單細胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)開啟了一個新時代，讓人們能夠無偏倚地記錄細胞表型。單細胞RNA測序?qū)嶒炘诓粩鄶U展，如今每次實驗可以分析數(shù)千個細胞，從而全面地了解細胞組成。zui近，研究人員正嘗試利用單細胞RNA測序來繪制整個細胞譜系、器官甚至生物體的細胞圖譜，其中zui引人關(guān)注的是人類細胞圖譜（HCA）
如何尋找適合自己實驗應(yīng)用的生物標志物2020/04/28
氧化應(yīng)激（OxidativeStress，OS）是機體活性氧成分與抗氧化系統(tǒng)之間平衡失調(diào)引起的一系列適應(yīng)性的反應(yīng)。干擾細胞正常的氧化還原狀態(tài)，會制造出過氧化物與自由基導(dǎo)致毒性作用，因此損害細胞的蛋白質(zhì)、脂類和核酸。發(fā)生在人類的氧化壓力，被認為是造成亞斯伯格癥候群、自閉癥、阿茲海默癥、帕金森氏癥、注意力缺陷過動癥、動脈粥樣硬化、心臟衰竭及癌癥等的成因。然而活性氧也有它的益處，免疫系統(tǒng)可利用活性氧攻擊并殺死病原。短期的氧化應(yīng)激在防止老化上，也提供了重要的步驟，稱做毒物興奮效應(yīng)。氧化應(yīng)激可通過測量活性
古朵生物：人工智能shou次發(fā)現(xiàn)強效抗生素2020/04/27
據(jù)《自然》報道，一項開創(chuàng)性的機器學(xué)習(xí)方法從1億多個分子中發(fā)現(xiàn)了強大的新型抗生素。這項研究由美國麻省理工學(xué)院合成生物學(xué)家JimCollins，相關(guān)成果日前發(fā)表在《細胞》上。研究人員表示，這種被稱為halicin的抗生素是人工智能（AI）*發(fā)現(xiàn)的。在之前的抗生素研發(fā)中，AI只協(xié)助其中的某些部分，但這一次是AI*從零開始識別出全新種類的抗生素，且沒有使用任何人類先前的假設(shè)?！把芯啃〗M不僅確定了候選分子，還在動物實驗中驗證了有希望的分子。”匹茲堡大學(xué)計算生物學(xué)家JacobDurrant說，“更重要的是，
古朵生物：單個B 細胞抗體制備技術(shù)及應(yīng)用2020/04/27
如今,單克隆抗體藥物以其*的作用機制及高效性,在腫瘤和自身免疫疾病的治療中發(fā)揮了不可估量的作用,成為全qiu的研發(fā)熱點，目前已有2400個單克隆抗體藥物處于研發(fā)及商業(yè)化階段。1975年雜交瘤技術(shù)問世[1]。1986年鼠源單克隆抗體藥物Muromonab的上市拉開了單克隆抗體發(fā)展的序幕。隨后的50年，單克隆抗體藥物經(jīng)歷了嵌合抗體-人源化抗體--全人源抗體四個階段，產(chǎn)生了抗體偶聯(lián)藥物、抗體融合蛋白、單域抗體等多種新型抗體藥物，標志著免疫療法黃金時代的開啟[2]。單克隆抗體藥物的推陳出新歸根于單克隆抗
古朵新聞：肌動蛋白的了解進展揭示了細胞功能2020/04/26
肌動蛋白是細胞中zui豐富，zui重要的蛋白質(zhì)之一的微小化學(xué)修飾，*以來一直有些神秘，其功能尚不*清楚，但賓夕法尼亞大學(xué)佩雷??爾曼醫(yī)學(xué)院的科學(xué)家現(xiàn)在朝著邁出了一大步消除神秘感。科學(xué)家們在《科學(xué)進展》中報道了肌動蛋白翻譯后修飾的發(fā)現(xiàn)，他們相信他們的發(fā)現(xiàn)為生命的構(gòu)建提供了啟示-類似于了解恒星是如何誕生或形成黑洞的。這些基本信息可以潛在地指導(dǎo)對各種疾病的研究，包括肌動蛋白缺陷或衰竭引起的肌肉無力和免疫缺陷綜合癥。這項研究表明肌動蛋白是如何被修飾的，并且應(yīng)該加速對肌動蛋白如何在細胞中起作用和被調(diào)節(jié)的進
古朵生物：細胞培養(yǎng)中一定要用血清嗎？2020/04/24
動物細胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域起著重要的作用。它在生物醫(yī)藥領(lǐng)域、細胞工程、酶工程等領(lǐng)域中都是*的工具。培養(yǎng)基是人工配制的滿足細胞生長和維持的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的發(fā)展大致經(jīng)過3個階段：天然培養(yǎng)基階段(直接采用某些組織凝塊、生物性液體和組織提取液等作為細胞的培養(yǎng)基)，合成培養(yǎng)基階段(如DMEM、RPMl1640等)和無血清培養(yǎng)基階段。合成培養(yǎng)基通常需在其中添加一些諸如血清(常用的如小牛血清、胎牛血清等，一般在5%-10%)等天然的體液性補充物才能較長時間地維持細胞生長。在無血清培養(yǎng)基出現(xiàn)之前，血清被廣
熒光定量PCR原理應(yīng)用及流程介紹 @古朵生物2020/04/23
熒光定量PCR簡介熒光定量PCR檢測技術(shù)誕生至今已10多年的時間，而其應(yīng)用一直都沒廣泛展開，究其原因，無外乎受制于相關(guān)儀器、試劑和技術(shù)的發(fā)展。近期，尤其是08年以來，儀器和試劑是遍地開花，這也使科研人員均躍躍欲試，都想借此技術(shù)使自己的研究能突飛猛進，發(fā)展勢頭通過查找每年所發(fā)表的文章數(shù)可一目了然。據(jù)有關(guān)統(tǒng)計，在Medline數(shù)據(jù)庫中，用“Taqman”或”realtimePCR”作為關(guān)鍵詞檢索，1996年是19篇，1999年157篇，到2003年就高達2984篇，2009年會是多少呢？我們不得而知
古朵生物：細胞培養(yǎng)常見污染的識別及處理2020/04/23
1、細菌：識別：細菌在顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，有球形，鏈形，桿形等。大家不必深究。只要發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁變黃，培養(yǎng)瓶頂部有一層細沙一樣的東西。就知道大事不好啦。見下圖。處理：可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理?？梢杂盟沫h(huán)素，慶大霉素，或者鏈霉素，前兩者的工作濃度是50μg/mL；鏈霉素的工作濃度是100μg/mL。其實，毛毛蟲說句實話，一旦發(fā)生污染，就已經(jīng)大勢已去了。如果細胞不是特別特別珍貴的話，還是趁早扔了，重起爐灶吧。所以，重要的還是防范于未然。做好培養(yǎng)間，CO2孵
從核酸制備到核酸檢測：準確結(jié)果，始于源頭2020/04/21
獲得高純度核酸通常是實驗的*步，也是非常重要的一步。古朵能為你提供從核酸制備到核酸檢測的分子生物學(xué)quan方位解決方案，準確結(jié)果，始于源頭。核酸制備*步：DNA和RNA純化DNA純化產(chǎn)品線基因組DNA純化產(chǎn)品基于硅膜離心柱法從哺乳動物組織/鼠尾、培養(yǎng)細胞、細菌、酵母、血液/干血斑中純化高質(zhì)量基因組DNA。質(zhì)粒DNA純化產(chǎn)品基于離子交換技術(shù)從大腸桿菌中獲得高產(chǎn)、轉(zhuǎn)染級別的質(zhì)粒DNA。DNA-PIAN段純化產(chǎn)品基于硅膜離心柱法快捷完成PCR產(chǎn)物、限制性內(nèi)切酶酶切產(chǎn)物、瓊脂糖電泳膠塊、DNA-PIAN
3D細胞培養(yǎng)系統(tǒng)，你選對了嗎？2020/04/21
你知道嗎？細胞在平面上生長是人為且不自然的，因為這與細胞能夠以*狀態(tài)進行旺盛生長的體內(nèi)環(huán)境并不相同。所以，傳統(tǒng)的2D單層細胞培養(yǎng)物很難恰當(dāng)?shù)胤从吵黾毎捏w內(nèi)生長環(huán)境，進而可能造成細胞結(jié)構(gòu)和組織功能的缺失。三維（3D）細胞培養(yǎng)技術(shù)能夠更好地模擬生物體內(nèi)細胞存活的自然環(huán)境，其自然條件可保持細胞間相互作用和更逼真的生化和生li反應(yīng)。在3D環(huán)境中，細胞對內(nèi)源性和外源性刺激（如溫度、pH、營養(yǎng)吸收、轉(zhuǎn)運和分化等方面的改變）應(yīng)答更接近于它們在體內(nèi)的反應(yīng)。再生醫(yī)學(xué)的力量為理解發(fā)育、老化和組織年輕化等許多有趣的
抗原要求及分類是單克隆抗體制備成功的關(guān)鍵2020/04/20
抗原又稱作免疫原，是指能引起抗體生成的物質(zhì)，能夠刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體或致敏淋巴細胞?？乖哂忻庖咴裕軌蛞疬B續(xù)的免疫反應(yīng)。原則上任何可以誘發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)都可以做抗原，包括天然抗原和人工合成抗原，如蛋白質(zhì)、多糖、脂類、核酸等。但是一個免疫原強的抗體應(yīng)滿足以下的要求：（1）分子量足夠大?？乖瓫Q定簇一般有6-8個氨基酸殘基構(gòu)成，平均5-10kD才會有一個抗原決定簇，因此分子量太小的多肽或蛋白難以形成一個抗原決定簇。（2）外源性要強。機體可以對自身物質(zhì)形成免疫耐受，因此抗原和體內(nèi)物質(zhì)*一
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么？2020/04/17
取血年齡不同：牛血清按照牛取血時間或牛齡可進行區(qū)分。胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。國產(chǎn)胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時，且未進行哺乳（unsuckled）進食的牛，有時還稱作國產(chǎn)新生牛。新生牛血清（NewbornCalfSerum，簡稱NBCS）指的是出生14天-3個月進行取血的牛。成年牛血清（AdultBovineSerum，簡稱ABS）指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。以上取血牛齡的差異主要是受
實驗室常用貯存液的配制參數(shù) 古朵新聞√2020/04/16
1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1gN，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫?！咀⒁狻勘０肪哂泻軓姷纳窠?jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應(yīng)戴手套和面具?？烧J為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹慎操作，因為它還可能會含有少量未聚合材料。一些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬
磷酸化抗體使用建議以及注意事項2020/04/15
WB磷酸化蛋白曝不出條帶的時候，會特別沮喪，特別希望有人指點一二。總結(jié)了下問題類型，不難發(fā)現(xiàn)，磷酸化抗體的使用，仍是許多人關(guān)心的重點，今天我們單獨把它拎出來說一說吧。1.確定樣本中磷酸化蛋白的表達量①對的樣本，②正確的處理方法和③合適的陽性對照是實驗成功的第1步。①實驗前需先查閱文獻或通過預(yù)實驗檢測該樣本是否表達，若該樣本根本就不表達目的蛋白，那就不要浪費感情了吧；②若正常情況下樣本的磷酸化水平過低或不表達，可通過物理或化學(xué)方法進行一定的刺激和誘導(dǎo)，刺激條件各不相同。但這并不代表刺激越多越好，充
古朵實驗：分子克隆常用基本技術(shù)說明2020/04/14
一、核酸的純化在分子克隆的所有操作中，zui基本的操作是核酸的純化。其關(guān)鍵步驟是去蛋白質(zhì)，通常只要用酚/lv仿。lv仿抽提核酸的溶液即可。每當(dāng)需要把克隆有某一些所用的酶滅活或去除以便進行下一步時，可進行這種抽提。然而，如要從細胞裂解液等復(fù)雜的分子混合物中純化核酸，則要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白質(zhì)后，再用有機溶劑抽提。這些廣譜的蛋白酶包括鏈霉蛋白酶及蛋白酶K等，它們對多種天然蛋白均有活性，（1）用酚lv仿抽提：這兩種有機溶劑合用，比單獨用酚抽提的除蛋白效果geng佳。繼而用lv仿抽提則可除去
古朵新聞：IHC免疫組化實驗垃圾和分類知多少？2020/04/13
*，Westernblot(WB)和免疫組化(IHC)都屬于免疫學(xué)常用的實驗技術(shù)。WB是通過SDS-PAGE分離蛋白質(zhì)樣品，然后轉(zhuǎn)移到固相載體上，利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理進行樣品檢測，可用于定性和半定量。而IHC是融合了免疫學(xué)原理（抗原抗體特異性結(jié)合）和組織學(xué)技術(shù)（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色，對組織（細胞）內(nèi)抗原進行定位、定性及通過ImageJ進行定量的研究(主要是定位)。與WB相比，IHC實驗步驟復(fù)雜，
單克隆抗體制備哪家強？古朵核心技術(shù)是關(guān)鍵！2020/04/10
古朵生物提供*定制化的單克隆抗體制備服務(wù)，可按照客戶終應(yīng)用要求制定個性化免疫、篩選及檢測方案等。針對多肽免疫，我們擁有專業(yè)高效的多肽設(shè)計軟件及高效偶聯(lián)方法，保證95%以上的成功率。憑借雜交瘤和獨jia第二代兔單克隆抗體技術(shù)，古朵生物已為客戶開發(fā)和生產(chǎn)了數(shù)千種單克隆抗體?？焖偈髥慰寺】贵w服務(wù)可以在60天內(nèi)交付您滿意的抗體。我們提供高性價比的定制抗體生產(chǎn)服務(wù)，生產(chǎn)的抗體可用于臨床前體外和體內(nèi)實驗，生產(chǎn)規(guī)模從毫克到100克不等。為什么選擇古朵生物的單克隆抗體制備服務(wù)？1.核xin技術(shù)先jin多種優(yōu)化的
古朵實驗：免疫熒光染色背景色太強如何解決?2020/04/09
免疫熒光染色是一種常用的一種生物化學(xué)檢查方法，常用于組織學(xué)中抗原或抗體的定位，也可用于體液標本中抗原或抗體的定量檢測。許多小伙伴，在做免疫熒光染色實驗時，碰到各種各樣的問題。事實上，掌握了免疫熒光染色實驗的原理、操作步驟及注意事項，要成功完成一項免疫熒光染色實驗并不難。1、免疫熒光技術(shù)是什么?免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術(shù)，主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合來顯示目的蛋白。免疫熒光技術(shù)既有抗原抗體反應(yīng)的高度特異性，又能在熒光顯微鏡下清晰
別錯過！血清知識大盤點?。?！古朵新聞√2020/04/08
由于血清來源于動物，且含有細胞培養(yǎng)中所需的各種營養(yǎng)（血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等），這奠定了血清是細胞培養(yǎng)實驗中zui普遍的試劑的基礎(chǔ)。目前血清采集地主要分布在以下國家：市面上的牛血清產(chǎn)品名稱雖然五花八門，但根據(jù)其不同的特性，追其根本，大致可分為以下四種。根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分：胎牛血清（FoetalBovineSerum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。國產(chǎn)胎牛血清（并無明確定義，但通常用此命名）指的是出生4-6小時，且未進行哺乳（
干貨分享：探討 rRNA去除的方法與必要性2020/04/07
遺傳中心法則表明，DNA是生物體內(nèi)遺傳信息的載體。遺傳信息在精密的調(diào)控下從DNA轉(zhuǎn)錄成RNA，再傳遞到蛋白質(zhì)。因此RNA被認為是DNA與蛋白質(zhì)之間生物信息傳遞的“橋梁”，在研究轉(zhuǎn)錄組信息中占有著重大的作用。背景介紹轉(zhuǎn)錄組（transcriptome）是指在某一特定的生li條件下，細胞、組織或者生物體內(nèi)所有的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的集合，即轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA總和，包括編碼RNA（即mRNA）和ncRNA（tRNA、rRNA、miRNA、lncRNA、circRNA）等不同類型的RNA分子。在這之中核糖體RNA
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