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WB、PCR、ELISA…何時(shí)使用這些技術(shù)？2021/08/06: 目前，針對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)有多種技術(shù)方法，那么我們?cè)撊绾闻袛噙x擇哪種方法適合呢？我們需要去了解實(shí)驗(yàn)方法的特性。無(wú)非就是用某種特定的刺激物（如細(xì)胞活素）去刺激一些細(xì)胞或組織，讓它們high起來(lái)，然后分析細(xì)胞對(duì)這些外源刺激物的反應(yīng)，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)哪條信號(hào)通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出來(lái)。每一種實(shí)驗(yàn)方法都有它的特性，下面就以下幾種方法做介紹：什么時(shí)候用免疫印跡實(shí)驗(yàn)？免疫印跡實(shí)驗(yàn)（WesternBlot，WB）可檢測(cè)信號(hào)通路中某種蛋白質(zhì)的特性、表達(dá)和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)。建立蛋白質(zhì)的個(gè)

應(yīng)對(duì)菌落蔓延，TTC的使用方法！2021/07/30: 關(guān)于TTC的使用，從剛開(kāi)始的菌落蔓延，搜索解決辦法，了解TTC之后琢磨使用劑量，可以說(shuō)是花了一段不短的時(shí)間。包括對(duì)于TTC的使用，也可以說(shuō)“眾說(shuō)紛紜”，好了，廢話(huà)說(shuō)到這，進(jìn)入正題：首先，TTC有毒，不僅毒細(xì)菌也毒人，所以使用的時(shí)候要小心（其實(shí)用別的化學(xué)試劑也要小心，不好意思，又說(shuō)廢話(huà)了）。接著是配置的0.5%的TTC溶液，你們可以根據(jù)個(gè)人的需要配置不同濃度。配置方法：實(shí)驗(yàn)室用水（我們用的桶裝純凈水）200mL，TTC粉末1.00g，水不用滅菌，稍微加熱（大概40℃水溫這樣就*溶解了），也可以攪拌

DNA電泳條帶怎么分析？請(qǐng)看本文！2021/07/28: 一、微笑形區(qū)帶（兩邊翹起，中間凹下）：形成原因：主要是由凝膠中間部分凝固不均勻引起的，多出現(xiàn)于較厚的凝膠中。處理辦法：待其充分凝固再做實(shí)驗(yàn)。二、皺眉形區(qū)帶（兩邊向下，中間鼓起）：形成原因：主要出現(xiàn)在蛋白質(zhì)垂直電泳槽中，一般是由兩板之間的底部間隙氣泡未排除干凈引起的。處理辦法：可在兩板之間加入適量緩沖液，以排除氣泡。三、區(qū)帶拖尾：形成原因：主要是由樣品溶解效果不佳或分離膠濃度過(guò)大引起的。處理辦法：加樣前離心；選擇適當(dāng)?shù)臉悠肪彌_液，加適量樣品促溶劑；電泳緩沖液放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，重新配制；降低凝膠濃度。四

單細(xì)胞凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程2021/07/27: 在細(xì)胞核中，DNA是環(huán)狀附著在核基質(zhì)上，細(xì)胞裂解過(guò)程中，核基質(zhì)被溶解、抽提，DNA的結(jié)構(gòu)則未發(fā)生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環(huán)向外展，同時(shí)由于暴露了陰電荷，在電場(chǎng)力的作用下，松動(dòng)的DNA環(huán)向陽(yáng)極遷移，但是由于這種松動(dòng)的DNA環(huán)一端仍附著于核DNA，其遷移距離受到限制，因此尾長(zhǎng)并不總是真實(shí)反映鏈缺口的多少。實(shí)際應(yīng)當(dāng)依靠尾長(zhǎng)與尾部的熒光強(qiáng)度同時(shí)來(lái)進(jìn)行分析。操作步驟：1、分離制備單細(xì)胞懸液：（1）體外培養(yǎng)的細(xì)胞株：用胰酶消化，吹打成單細(xì)胞懸液（2）體內(nèi)臟器細(xì)胞：處死動(dòng)

真核細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題分析2021/07/22: 本文主要介紹了真核細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能遇到的問(wèn)題，包括可能的原因及對(duì)應(yīng)的解決方案。1.細(xì)胞培養(yǎng)不貼壁可能原因胰蛋白酶消化過(guò)度支原體污染培養(yǎng)液中無(wú)貼壁因子解決方法①縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度②分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體③清潔支架和培養(yǎng)箱2.培養(yǎng)液PH變化過(guò)快可能原因CO2張力不對(duì)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足培養(yǎng)液中鹽濃度不正確/li細(xì)菌、酵母或真菌污染解決方法①按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5％

質(zhì)控樣是什么意思？質(zhì)控樣同標(biāo)樣的區(qū)別2021/07/16: 質(zhì)控樣，一般是實(shí)驗(yàn)室用來(lái)檢驗(yàn)曲線(xiàn)做的是否標(biāo)準(zhǔn)用的，他是一個(gè)已知濃度的樣品且濃度有正負(fù)誤差，比如砷質(zhì)控樣濃度為3.240±0.012毫克/升。你將他帶入你的曲線(xiàn)進(jìn)行分析，看得出的數(shù)據(jù)是否在質(zhì)控樣濃度誤差范圍內(nèi)，如果在范圍內(nèi)，則可以說(shuō)明你的曲線(xiàn)沒(méi)有問(wèn)題，相應(yīng)的其他數(shù)據(jù)也正確。如下圖質(zhì)控樣在檢測(cè)活動(dòng)中的重要性檢測(cè)過(guò)程中涉及到很多流程或者叫做步驟吧，或多多少會(huì)遇到一些不確定的因素，最終影響著我們的檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，那么如何確保我們的檢測(cè)是在可控范圍內(nèi)，換句話(huà)說(shuō)，如何保證我們的檢測(cè)結(jié)果的有效性和可比性？這

PBS緩沖液和Hanks緩沖液的區(qū)別2021/07/14: 實(shí)驗(yàn)時(shí)經(jīng)常用到PBS緩沖液，但是很多文獻(xiàn)里面也用到了Hanks緩沖液，不知道這兩種緩沖液在細(xì)胞培養(yǎng)方面有什么區(qū)別?也就是說(shuō)它分別適合于哪些情況?PBS：磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱(chēng)磷酸鹽緩沖溶液，一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制，因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液，稱(chēng)量不同質(zhì)量的磷酸鹽，也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。其配置方法如下：采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步驟進(jìn)行：(1)配制1/

試劑瓶中的液體試劑取用規(guī)則2021/07/13: 化學(xué)試劑按照形態(tài)的差異分為固體、液體、粉末、顆粒等不同種類(lèi)，針對(duì)不同的試劑需要選用符合其特性的試劑瓶，所以試劑在取用時(shí)也會(huì)有所差別。為了防止試劑灑出來(lái)，同時(shí)避免試劑揮發(fā)，液體試劑主要存放在瓶口較小的細(xì)口瓶中，取用時(shí)遵循以下規(guī)則：1、用少量液體試劑時(shí)，常使用膠頭滴管吸取，用量較多時(shí)則采用傾瀉法。2、從細(xì)口瓶中將液體傾入容器時(shí)，把試劑瓶上貼有標(biāo)簽的一面握在手心，另一手將容器斜持、并使瓶口與容器口相接觸，逐漸傾斜試劑瓶，倒出試劑。3、試劑應(yīng)該沿著容器壁流入容器，或沿著潔凈的玻棒將液體試劑引流入細(xì)口或平

滴定分析標(biāo)準(zhǔn)溶液有哪些制備方法？2021/07/12: 滴定分析標(biāo)準(zhǔn)溶液：已知準(zhǔn)確濃度的、經(jīng)過(guò)均勻性和穩(wěn)定性研究的、有不間斷溯源鏈的用于滴定分析的溶液。滴定分析標(biāo)準(zhǔn)溶液制備方法有兩種：一、直接配制法具體操作步驟：準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的純物質(zhì)，溶解并稀釋到準(zhǔn)確體積，根據(jù)計(jì)算求出該溶液的準(zhǔn)確濃度。例如：重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、lv化鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液制備等。直接配制法配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的物質(zhì)必須具備：1.必須有足夠的純度，含量≥99.9%，其雜質(zhì)含量應(yīng)少于容量分析所允許的誤差程度。例如：制備重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液使用的基準(zhǔn)物質(zhì)是國(guó)家二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重鉻酸鉀，其含量為99.99%

血清與血漿的區(qū)別和各自作用2021/07/05: 血液雖然離我們很近，但大部分人對(duì)它的了解是有限的，甚至許多人看到血液還會(huì)有一點(diǎn)害怕，其實(shí)對(duì)它有足夠的了解是十分有必要的，可以避免陷入一些誤區(qū)。血壓主要由血清與血漿組成，不過(guò)血清和血漿雖然關(guān)系密切，但有許多不同，下面就讓我們一起來(lái)看看血清與血漿的不同。血清與血漿的區(qū)別血漿一般指的是離開(kāi)人體后的血液經(jīng)過(guò)抗凝的處理之后，然后再經(jīng)過(guò)離心沉淀的物質(zhì)，它是不含有細(xì)胞成分的，含有纖維蛋白原比較多，而血清含有許多特異性的免疫體，它是保護(hù)我們身體健康的關(guān)鍵元素，兩者的不同主要有三點(diǎn)，分別是顏色不同、密度不同、成分

什么是抗體？抗體的分類(lèi)有哪些2021/07/02: 說(shuō)起抗體，這是我們?cè)谄綍r(shí)經(jīng)常聽(tīng)到的詞匯，因?yàn)榭贵w與我們的健康是息息相關(guān)的，也可以說(shuō)抗體是不能缺少的。那么大家知道抗體是什么嗎，抗體的功能有哪些呢，抗體有哪些類(lèi)型呢?想要了解的朋友就一起來(lái)看看下面的內(nèi)容吧?？贵w是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌，被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征，該外來(lái)目標(biāo)被稱(chēng)為抗原?？贵w是具有4條多肽鏈的對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)，其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈(H

穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物/標(biāo)記物分析介紹2021/07/01: 同位素標(biāo)記(同位素內(nèi)標(biāo))較于其同種元素的未標(biāo)物具有質(zhì)子數(shù)相同中子數(shù)變化的特點(diǎn)，通過(guò)用同位素取代特定原子來(lái)標(biāo)記反應(yīng)物，然后使反應(yīng)物進(jìn)行反應(yīng)，并檢測(cè)中子數(shù)變化的原子，可通過(guò)反應(yīng)、代謝途徑或細(xì)胞跟蹤同位素。同位素內(nèi)標(biāo)物與對(duì)應(yīng)的未標(biāo)物理化性質(zhì)相似，通過(guò)光吸收和免疫的方法無(wú)法區(qū)分，在色譜中如果將同位素內(nèi)標(biāo)物與對(duì)應(yīng)的未標(biāo)物用同樣的檢測(cè)方法，其保留時(shí)間也幾乎一致，無(wú)法分辨。穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)是質(zhì)譜方法即穩(wěn)定性同位素稀釋法du有的，在質(zhì)譜(Mass)中，如果加進(jìn)同位素內(nèi)標(biāo)，那測(cè)出來(lái)的值較未標(biāo)物有很大的差值，質(zhì)譜能

環(huán)境中微生物生物量的測(cè)定2021/06/29: 微生物量的測(cè)定可以反映水生化處理系統(tǒng)中生物生長(zhǎng)情況，運(yùn)行是否正常。而對(duì)環(huán)境的衛(wèi)生檢驗(yàn)則反映環(huán)境污染的情況。生物量主要是直接或間接測(cè)定細(xì)菌群體的細(xì)胞數(shù)量或重量、原生質(zhì)及細(xì)胞中某些代謝活動(dòng)的變化等。一、細(xì)菌活菌數(shù)的測(cè)定1．平板菌落計(jì)數(shù)法平板菌落計(jì)數(shù)法是根據(jù)在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落計(jì)數(shù)，每一個(gè)菌落由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成，為肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞群體。根據(jù)菌落數(shù)可以計(jì)算出待測(cè)菌液中的活菌數(shù)量。（1）取水樣1ml利用無(wú)菌水按10倍數(shù)作一系列稀釋?zhuān)畼酉♂対舛纫栽谄桨迳祥L(zhǎng)出的菌落數(shù)在30～300個(gè)之間為宜。稀釋時(shí)應(yīng)盡

PCR常見(jiàn)問(wèn)題匯總！2021/06/28: PCR產(chǎn)物的電泳檢測(cè)時(shí)間一般為48h以?xún)?nèi)，有些蕞hao于當(dāng)日電泳檢測(cè)，大于48h后帶型不規(guī)則甚致消失。假陰性，不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及，④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對(duì)上述環(huán)節(jié)進(jìn)行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質(zhì)，②模板中含有Taq酶抑制劑，③模板中蛋白質(zhì)沒(méi)有消化除凈，特別是染色體中的組蛋白，④在提取制備模板時(shí)丟失過(guò)多，或吸入酚。⑤模板核酸變性不*。在酶和引物質(zhì)量好時(shí)，不出現(xiàn)擴(kuò)增帶，極有可能是標(biāo)本的消化處理，模板核酸提取過(guò)程出

污染細(xì)胞的支原體從哪里來(lái)？2021/06/25: 在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，人們常常關(guān)注細(xì)菌和真菌的污染，認(rèn)為它們是細(xì)胞培養(yǎng)的主要干擾因素。但其實(shí)，更嚴(yán)重的是支原體的感染，它的發(fā)生率非常高，而且不易被發(fā)現(xiàn)。古朵生物為您分析污染細(xì)胞的支原體從哪里來(lái)。不僅普通光鏡下無(wú)法發(fā)現(xiàn)支原體，而且培養(yǎng)基也不容易變色。但支原體對(duì)細(xì)胞的各種干擾卻是不容忽視的。它不僅導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳，生長(zhǎng)速度慢，而且會(huì)使細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，在預(yù)防和治療支原體污染之前，有必要去了解細(xì)胞被支原體污染的可能途徑。支原體可以通過(guò)頂部的細(xì)胞器特異性和宿主細(xì)胞結(jié)

實(shí)驗(yàn)記錄必須符合這些條件，你做到了嗎？2021/06/24: 實(shí)驗(yàn)室分析結(jié)果的可靠性和可信性是一個(gè)基本的期望和要求，以反映實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際工作。實(shí)驗(yàn)記錄要想變得可靠和信賴(lài)，必須符合以下條件：1、易讀性除了記載寶藏地圖的四十二章經(jīng)和用來(lái)記載武功的圣火令上的蝌蚪文，實(shí)驗(yàn)記錄不得采用人類(lèi)失傳或只有世外高人才能懂的語(yǔ)言書(shū)寫(xiě)。不能被讀出或理解的記錄沒(méi)有價(jià)值并且可能被當(dāng)廢紙扔掉。所有實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)當(dāng)遵循一致的語(yǔ)法規(guī)則。堅(jiān)決避免采用俚語(yǔ)、暗號(hào)、吐火文等不易于理解的語(yǔ)言記錄。這也是實(shí)驗(yàn)記錄要引入第二個(gè)人進(jìn)行見(jiàn)證的原因，見(jiàn)證人在這里要行使監(jiān)督權(quán)。2、可歸屬性任何一份實(shí)驗(yàn)記錄的創(chuàng)建都

實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)化學(xué)品使用要求（法規(guī)要求）2021/06/24: 危險(xiǎn)化學(xué)品的安全要求1.使用危險(xiǎn)化學(xué)品的單位，其使用條件（包括工藝）應(yīng)當(dāng)符合法律、行政法規(guī)的規(guī)定和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求，并根據(jù)所使用的危險(xiǎn)化學(xué)品的種類(lèi)、危險(xiǎn)特性以及使用量和使用方式，建立、健全使用危險(xiǎn)化學(xué)品的安全管理規(guī)章制度和安全操作規(guī)程，保證危險(xiǎn)化學(xué)品的安全使用。2.使用危險(xiǎn)化學(xué)品從事生產(chǎn)并且使用量達(dá)到規(guī)定數(shù)量的化工企業(yè)，應(yīng)當(dāng)取得危險(xiǎn)化學(xué)品安全使用許可證。危險(xiǎn)化學(xué)品使用量的數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)，由國(guó)務(wù)院安全生產(chǎn)監(jiān)督管理部門(mén)會(huì)同國(guó)務(wù)院公安部門(mén)、農(nóng)業(yè)主管部門(mén)確定并公布。3.申請(qǐng)危險(xiǎn)化學(xué)品安全使用許可證的化

微生物菌種菌劑有多少種?怎么分類(lèi)？2021/06/22: 微生物菌種菌劑有很多種分類(lèi)，按微生物菌種菌劑中特定的微生物大致可以分為細(xì)菌、放線(xiàn)菌（比如抗生菌）、真菌（如菌根真菌類(lèi)）、固氮藍(lán)藻菌等。當(dāng)然，還可以按微生物菌種菌劑的作用機(jī)理等進(jìn)行分類(lèi)。微生物菌種菌劑是一種含有活微生物的特定制品，以微生物生命活動(dòng)的過(guò)程和產(chǎn)物來(lái)改善作物營(yíng)養(yǎng)件，發(fā)揮土壤潛在肥力，刺激作物生長(zhǎng)發(fā)育，抵抗各種病蟲(chóng)害，從而提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)。它并不像一般的肥料那樣，可以直接給作物提供養(yǎng)料物質(zhì)。1、按微生物菌種菌劑制品內(nèi)含物可分為單純的微生物菌劑和復(fù)合(或復(fù)混)微生物菌劑等.例如,鶴壁人元生

原料藥合成工藝的關(guān)鍵要素有哪些？2021/06/21: API是用于制造藥物制劑的活性成分，通常是原料藥通過(guò)化學(xué)合成、半合成以及微生物發(fā)酵或天然產(chǎn)物分離獲得，經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)化學(xué)單元反應(yīng)及其操作制成的。原料藥的藥物合成工藝研究是藥物研究和生產(chǎn)的重要組成部分，處于藥物研發(fā)的基礎(chǔ)，是藥品質(zhì)量形成的重要環(huán)節(jié)。下面來(lái)簡(jiǎn)單介紹以下原料藥合成工藝研究中涉及的關(guān)鍵要素。藥物合成是藥物化學(xué)的中心，是藥物改造以及驗(yàn)證設(shè)計(jì)藥物的關(guān)鍵，在醫(yī)藥工業(yè)中占有極重要的地位。通常優(yōu)良的藥物合成工藝具有以下特點(diǎn)：（1）可行性－采用申報(bào)的工藝路線(xiàn)是否能夠制備出目標(biāo)化合物。（2）可控性－重

微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術(shù)2021/06/17: 微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術(shù)一、安瓶管開(kāi)封1．用浸過(guò)70％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。2．用火焰將安瓿管頂端加熱。3．滴無(wú)菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開(kāi)裂。4．用挫刀或鑷子敲下已開(kāi)裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復(fù)培養(yǎng)1．用無(wú)菌吸管，吸取0.3～0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴人安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍于菌體溶解呈懸浮狀。2．取0.1～0.2ml菌體懸浮液，移植于適宜的瓊脂斜面／平板培養(yǎng)基上，剩余的菌液，注入適宜的液體培養(yǎng)基內(nèi)，然后在建議的溫度下培養(yǎng)。3．若未能活化，或活化后有疑問(wèn)時(shí)，請(qǐng)于收到菌種

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