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上海古朵生物科技有限公司
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核酸的結(jié)構(gòu)和功能!@古朵技術(shù)2020/08/31
核酸的分子組成;DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)、高級(jí)結(jié)構(gòu)及其功能;幾種主要RNA(mRNA、tRNA)的結(jié)構(gòu)與功能;DNA的理化性質(zhì)及應(yīng)用。重點(diǎn):DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)——雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn);DNA的變性復(fù)性特點(diǎn)及此特點(diǎn)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用是?;局R(shí)與理論:一、核酸的化學(xué)組成核酸是以核苷酸為基本組成單位的生物大分子。包括兩類:一類為脫氧核糖核酸(DNA),另一類為核糖核酸(RNA)。DNA存在于細(xì)胞核和線粒體內(nèi),攜帶遺傳信息;RNA存在于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中,參與細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的表達(dá)。核酸的基本組成單質(zhì)是核苷酸,而核苷
微生物檢測(cè)過程中的問題及解答2020/08/27
1、金黃色葡萄菌檢測(cè)第二法,從典型菌落中任選5個(gè),是從一個(gè)平行樣中選5個(gè)還是5個(gè)平行樣加起來選5個(gè)?答案:從符合計(jì)數(shù)范圍的稀釋度三個(gè)平行樣中任選五個(gè)做血漿凝固酶試驗(yàn)。2、微生物回收采用涂布法時(shí),試驗(yàn)組1ml含菌量不大于100cfu。涂布時(shí)取供試液0.2ml,含菌量會(huì)不會(huì)太少,不利于計(jì)數(shù)?答案:涂布法回收準(zhǔn)備工作是取隔夜培養(yǎng)物0.2ml,進(jìn)行梯度稀釋,大概稀釋到10的6次方可以達(dá)到100cfu/ml,然后分別取0.3,0.3,0.4ml進(jìn)行涂布,也可以前后兩個(gè)梯度均進(jìn)行334涂布。3、哪些奶粉需要
怎么建穩(wěn)轉(zhuǎn)株才能真的穩(wěn)?2020/08/19
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,即進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒整合入細(xì)胞基因組中,并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。這是相對(duì)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染而言的。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)時(shí)間短暫,外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,不能隨細(xì)胞分裂而一同復(fù)制,導(dǎo)致后拷貝數(shù)被稀釋,無法達(dá)到持續(xù)表達(dá)外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。一般如下情況需要構(gòu)建穩(wěn)定株1.*在目的細(xì)胞中研究基因功能,通過構(gòu)建穩(wěn)定株,可以大大降低頻繁轉(zhuǎn)染或者病毒包裝的成本,也*方便實(shí)驗(yàn)研究;2.部分蛋白半衰期極長(zhǎng),瞬時(shí)RNA只能干擾表達(dá),無法去除已經(jīng)表達(dá)的
牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用2020/08/13
生物技術(shù)已經(jīng)被世界各國(guó)視為一種高技術(shù),在整個(gè)科學(xué)技術(shù)中占據(jù)了特殊的顯著地位,特別是生命科學(xué)的發(fā)展更離不生物技術(shù),生命科學(xué)的發(fā)展備受各國(guó)的重視。我國(guó)在很多大學(xué)中都設(shè)立了生命*?,F(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的?;蚬こ桃腋我呙绾芏嗍且訡HO細(xì)胞作為載體;細(xì)胞工程中更是離不細(xì)胞培養(yǎng),雜交瘤單克
抗生素檢定用芽孢懸液的制備及注意事項(xiàng)2020/07/15
管碟法是國(guó)內(nèi)外常用的抗生素微生物檢定法,利用管碟法測(cè)定抗生素效價(jià),具有準(zhǔn)確、直觀、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛采用。但是整個(gè)試驗(yàn)過程中影響結(jié)果的因素很多,任何一個(gè)環(huán)節(jié)操作不當(dāng)或者忽略就會(huì)造成很大誤差,導(dǎo)致整組試驗(yàn)失敗。其中,芽孢懸液的制備就有很多需要注意的地方。在用管碟法檢定抗生素時(shí),需要將菌懸液與培養(yǎng)基混合均勻、覆蓋在底層培養(yǎng)基上,以形成抑菌圈。其中,對(duì)于菌懸液的制備要求為:將所用菌的斜面培養(yǎng)物用1~2ml滅菌水洗下,形成菌懸液;將菌懸液在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿上均勻涂布,置于35~37℃條件下培養(yǎng)7天;
兩種RT-qPCR方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較2020/06/09
實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是基于PCR的革命性方法,這一技術(shù)是PCR高靈敏度和實(shí)時(shí)檢測(cè)相結(jié)合的結(jié)果。實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-qPCR)的*特征就是把目的基因的擴(kuò)增與熒光信號(hào)聯(lián)xi起來,并將其量化。在定量基因表達(dá)分析,目前有兩種方法shou歡迎,SYBRGreenandTaqMan,那么這兩種哪個(gè)更好呢?本文分別分析其優(yōu)缺點(diǎn)。一、熒光染料法(SYBRGreen)其原理是:在PCR反應(yīng)體系中加入過量熒光染料,DNA擴(kuò)增的過程中,熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈,發(fā)射熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,熒光強(qiáng)
胎牛血清與新生牛血清區(qū)別在哪?2020/06/08
胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室里細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅ奈唇佑|過外界,而使得其血清中所含的抗體和補(bǔ)體幾乎沒有對(duì)細(xì)胞有害的成分。并且高質(zhì)量的胎牛血清含有的豐富營(yíng)養(yǎng)成分可以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)需求,在應(yīng)用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)中發(fā)揮出重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢?想知道兩者之間都有哪些區(qū)別不妨看看以下小編歸納的幾點(diǎn)內(nèi)容:胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們?cè)谖窗l(fā)育*
干細(xì)胞抗衰老,能給身體帶來哪些變化?2020/06/08
人“zui”怕的是什么?死亡?疾?。慷疾皇?。是衰老!這是歐洲一家趣味生活調(diào)查機(jī)構(gòu)得出的結(jié)果。因?yàn)?,來自死亡的恐懼是短暫的,甚至偶發(fā)于瞬間。所以,很少有人每天都為此戰(zhàn)戰(zhàn)兢兢。疾病,人們怕,卻不會(huì)特別擔(dān)心。因?yàn)楸缺冉允堑尼t(yī)院、數(shù)不勝數(shù)的名醫(yī)成為人們心里妥妥的依靠。唯有衰老,*難助、金錢無力。一旦越過時(shí)光的懸崖,就會(huì)出現(xiàn)“衰老加速度”,一發(fā)而不可收拾。無論再如何“搶救”、如何“裝修”都于事無補(bǔ)。于是,每天對(duì)鏡貼花黃,每天傷感愁斷腸……隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,人們發(fā)現(xiàn)zuike學(xué)有效的方法就是從源頭、從肌體
石蠟組織切片制作全過程的注意事項(xiàng)2020/06/05
(一)石蠟切片注意事項(xiàng)(1)組織脫水、透明和浸蠟在脫水過程中,所用各級(jí)酒精的純度應(yīng)盡量保持,以便將組織內(nèi)的水分*脫去。在*中的時(shí)間不宜過長(zhǎng),以防組織過硬,造成切片不順暢。如果*中含有水分,則組織脫水不*。這種含有水分的組織二甲苯不能*浸入,造成切片無法透明而呈現(xiàn)混濁現(xiàn)象。此時(shí)可將組織重行在新*中脫水。透明所用二甲苯應(yīng)保持純度,否則透明難以充分,不利于石蠟滲透。組織在二甲苯中的時(shí)間需要嚴(yán)格掌握,時(shí)間過長(zhǎng)則組織脆硬易碎,時(shí)間過短石蠟不易浸入。因?yàn)橥该魉钑r(shí)間較短,所以透明時(shí)間必須注意。浸蠟的溫度不可
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室建設(shè),你必須知道的5件事!2020/06/04
組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究的對(duì)象不一般,它是具有完整生命力的生物單位,因此與其他一般實(shí)驗(yàn)工作不同,要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。本文將主要針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,講解建設(shè)使用注意事項(xiàng)。一、基礎(chǔ)建設(shè)方案之墻頂?shù)兀?)墻體廢物暫存間、強(qiáng)電間、水處理間可采用乳膠漆墻面,其他實(shí)驗(yàn)室區(qū)域采用玻鎂板墻體。玻鎂板是氧化鎂、氯化鎂、和水三元體系,具有防火防水、無味無毒、高強(qiáng)質(zhì)輕、施工方便、使用壽命長(zhǎng)等特點(diǎn)。(2)天花防火等級(jí)達(dá)到A級(jí):天花選用彩鋼板。實(shí)用美觀,且易清潔消毒、光滑防水。防火等級(jí)達(dá)到B1級(jí)
細(xì)菌裂解的操作 古朵新聞√2020/06/03
一、菌體的裂解1、怎樣裂解細(xì)菌?細(xì)胞的破碎方法1.高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至zui慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。2.超聲波處理法:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鐘,此法的缺點(diǎn)是在處理過程會(huì)產(chǎn)生大量的熱,應(yīng)采取相應(yīng)降溫措施,時(shí)間以及超聲間歇時(shí)間、超聲時(shí)
酵母粉、酵母提取物、酵母浸粉和酵母浸膏的區(qū)別您知道嗎?2020/06/01
在給許多客戶介紹酵母浸粉時(shí),很多人都會(huì)將其與酵母粉混為一談,經(jīng)常會(huì)問:“酵母浸粉不就是酵母粉嗎?”“酵母浸膏和酵母浸粉哪個(gè)好呢?”首先我們了解一下什么是酵母粉、酵母浸粉和酵母浸膏吧!酵母粉含義:一般是指滅活的酵母,產(chǎn)品成分主要是失去活性的酵母菌體,營(yíng)養(yǎng)成分包括仍然包裹在菌體內(nèi)部的粗蛋白、胞壁多糖以及豐富的維生素、生長(zhǎng)素、微量元素等。酵母粉分類:分糖蜜酵母粉與啤酒渣酵母粉兩大類,前者專門發(fā)酵生產(chǎn)并干燥制成,以糖蜜為主要原料,品質(zhì)好且質(zhì)量穩(wěn)定;后者采用啤酒生產(chǎn)的廢料-廢啤酒酵母泥為原料,一般采取滾筒
牛肉浸膏和牛肉浸粉哪個(gè)更適合您?2020/06/01
很多客戶在選擇產(chǎn)品的時(shí)候,不知道究竟該選用牛肉浸膏還是牛肉浸粉。針對(duì)這個(gè)問題,古朵生物為大家解惑!【牛肉浸膏簡(jiǎn)介】牛肉浸膏(BeefExtract),是采用新鮮牛肉經(jīng)過剔除脂肪、消化、過濾、濃縮而得到的一種棕黃色至棕褐色的膏狀物。有牛肉自然香味,易溶于水,水溶液呈淡黃色。牛肉浸膏當(dāng)中含有肌酸、肌酸酐、多肽類、氨基酸類、核苷酸類、有機(jī)酸類、礦物質(zhì)類及維生素類的水溶性物質(zhì)。該產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生物制藥發(fā)酵及各種培養(yǎng)基的制備。在當(dāng)中它起的主要作用是補(bǔ)充蛋白胨以及其它氮源的營(yíng)養(yǎng)不足,一般的用量為0.3%~0
抗壞血酸含量測(cè)定( 2,6 一二氯酚靛酚法)2020/05/29
一、目的學(xué)習(xí)維生素C的生li功能和性質(zhì),掌握用2,6一二氯酚靛酚法測(cè)定維生素C的原理和方法。二、原理維生素C是一種水溶性維生素,是人類營(yíng)養(yǎng)中重要的維生素之一,人體缺乏維生素C時(shí)會(huì)出現(xiàn)壞血病,因此它又被稱為抗壞血酸。此外維生素C還具有預(yù)防和治療感冒以及抑制致癌物質(zhì)產(chǎn)生的作用。維生素C的分布很廣,尤其在水果(如彌猴桃、橘子、檸檬、山楂、袖子、草莓等)和蔬菜(莧菜、芹菜、青椒、菠菜、黃瓜、番茄等)中的含量更為豐富。不同栽培條件、不同成熟度和不同的加工貯藏方法,都可以影響水果、蔬菜的抗壞血酸含量。測(cè)定抗
ATCC細(xì)胞解凍和培養(yǎng)指南 @古朵新聞2020/05/28
細(xì)胞解凍和培養(yǎng)指南凍存的ATCC細(xì)胞株和雜交瘤細(xì)胞株在運(yùn)送過程中使用干冰保持低溫。收到凍存細(xì)胞后,可以立即解凍復(fù)蘇,去除二甲基亞砜(DMSO)后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。如果不立即復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞,必須將細(xì)胞凍存管放置于液氮罐氣相層存儲(chǔ)。請(qǐng)不要將細(xì)胞存儲(chǔ)在-130℃以上的溫度。如果溫度不夠低,達(dá)不到-130℃,細(xì)胞活力會(huì)迅速下降。操作*ATCC*在操作凍存的ATCC細(xì)胞株時(shí)使用手套,工作服和防護(hù)面具以避免任何事故發(fā)生。檢查包裝,查看是否有任何破裂或滲漏。凍存的ATCC細(xì)胞株應(yīng)處于固體狀。將凍存的ATCC細(xì)胞株從
細(xì)胞培養(yǎng)難易取決于選擇的血清 古朵新聞√2020/05/28
細(xì)胞是非常脆弱的,一不小心就會(huì)出現(xiàn)變數(shù),提高細(xì)胞成活率提高實(shí)驗(yàn)成功率,要選擇一款優(yōu)質(zhì)的血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基,血清選錯(cuò)了,細(xì)胞自然狀態(tài)會(huì)受影響。?據(jù)1997年出版的Medicalandhealthcaremarketplaceguide估測(cè),歐美市場(chǎng)每年用于生物藥物和疫苗生產(chǎn)的胎牛血清為50萬升,價(jià)值10億美元,而使用胎牛血清后所產(chǎn)出的產(chǎn)值為40億美元,目前的生物技術(shù)產(chǎn)品和病毒性疫苗的生產(chǎn)大多數(shù)仍依靠細(xì)胞培養(yǎng)來表達(dá)產(chǎn)物和擴(kuò)增病毒。牛血清的需求量以每年25%的速度增長(zhǎng)。血清需求量不斷增加
古朵技術(shù):胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng)用處2020/05/27
做細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)人員來講胎牛血清一定不陌生,那么胎牛血清參與細(xì)胞相關(guān)的科學(xué)實(shí)驗(yàn)都起到什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生li條件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生li平衡的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培
微生物的糖類發(fā)酵實(shí)驗(yàn)說明2020/05/27
糖發(fā)酵試驗(yàn)是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們?cè)诜纸馓穷愇镔|(zhì)的能力上有很大的差異。有些細(xì)菌能分解某種糖產(chǎn)生有機(jī)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫氣、甲烷、二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不同的細(xì)菌可根據(jù)分解利用糖能力的差異表現(xiàn)出是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作為鑒定菌種的依據(jù)。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨,指示劑(
古朵生物:電泳的作用各位了解嗎?2020/05/26
在一定但不多的場(chǎng)合下,我們能聽到電泳這個(gè)詞匯。很多人的第1反應(yīng)或許和小編一樣,都以為是游泳的一種新方式。但是實(shí)際上,電泳和游泳是沒什么關(guān)系的。不賣關(guān)子了,好奇的朋友就趕緊和小編一起來了解一下電泳是什么把!一、電泳是什么在一定的條件下,帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度效果下,單位時(shí)刻內(nèi)移動(dòng)的間隔為常數(shù),是該帶電粒子的物化特征性常數(shù)[。不一樣帶電粒子因所帶電荷不一樣,或雖所帶電荷一樣但荷質(zhì)比不一樣,在同一電場(chǎng)中電泳,經(jīng)必定時(shí)刻后,因?yàn)橐苿?dòng)間隔不一樣而彼此別離。分隔的間隔與外加電場(chǎng)的電壓與電泳時(shí)刻成正比。在外加
古朵生物:常用的檢測(cè)核酸的方法2020/05/26
Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料,常用于雙鏈DNA的定量檢測(cè)。歷來DNA濃度的測(cè)定在cDNA文庫(kù)的構(gòu)建,DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測(cè)等領(lǐng)域中具有重要意義。疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測(cè)更是直接關(guān)系到人類的健康。常用的檢測(cè)核酸的方法有:1)紫外吸光法(A260),該法操作簡(jiǎn)便,但DNA樣品中核苷酸、單鏈DNA、RNA和蛋白質(zhì)對(duì)紫外吸收信號(hào)影響很大,還容易受到核酸樣品中污染物的干擾,不能區(qū)分DNA和RNA,而且靈敏度低(ΔA260=0.1相當(dāng)于5ug/ml的dsDNA);2)探
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