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Elisa常見樣本的處理方法2017/04/20: Elisa常見樣本的處理方法Elisa是一種快速、靈敏、準(zhǔn)確可靠的一種定量分析方法，樣本的處理對于Elisa實(shí)驗(yàn)的成功有著舉足輕重的作用。利用ELISA進(jìn)行檢測的樣本類型包括常見的血液（血清、血漿），組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水、前列腺液、液、道分泌物等，這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到Elisa實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。下面我們就常見的樣本處理方法，供研究者參考。1、血液樣本血液采取后應(yīng)盡快進(jìn)行處理，使血清（漿）從與血細(xì)胞接

細(xì)胞培養(yǎng)所有過程及常見問題2017/04/11: 細(xì)胞培養(yǎng)所有過程及常見問題細(xì)胞培養(yǎng)是科研入門基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，必須掌握。對于已經(jīng)掌握了的人來說，細(xì)胞培養(yǎng)很簡單；然而對于還沒有入門的人來說，不知所言。對于實(shí)驗(yàn)小白來說首先要了解細(xì)胞來源，哪里購買細(xì)胞株，細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)設(shè)備，細(xì)胞培養(yǎng)試劑的使用與選擇等；而對于老司機(jī)來說，需要知道如何鑒定細(xì)胞污染以及如何處理細(xì)胞濡染，如何選擇合適的血清和培養(yǎng)基，消化細(xì)胞*的選擇以及用量等等常見問題。先談?wù)勛约杭?xì)胞培養(yǎng)過程的一些經(jīng)驗(yàn)。1.細(xì)胞株的購買：細(xì)胞株到正規(guī)的公司購買，如ATCC，中科院細(xì)胞庫（北京，上海，武漢等地都要細(xì)

怎樣避免ELISA實(shí)驗(yàn)過程中的過失2017/03/30: 怎樣避免ELISA實(shí)驗(yàn)過程中的過失如何面對ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失ELISA試劑盒具有靈敏性高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，那怎樣避免ELISA實(shí)驗(yàn)過程中的過失呢？*：檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。第二：操作前仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)，比如洗板次數(shù)的掌握等。第三：評估試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對準(zhǔn)

人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)正在如何重塑當(dāng)今的醫(yī)療產(chǎn)業(yè)？2017/03/23: 人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)正在如何重塑當(dāng)今的醫(yī)療產(chǎn)業(yè)？在醫(yī)療健康領(lǐng)域活躍著世界上創(chuàng)新性的初創(chuàng)公司，他們致力于為人類帶來更高質(zhì)量的生活和更長的生命。軟件和信息技術(shù)刺激了這些創(chuàng)新的產(chǎn)生和發(fā)展，數(shù)字化的健康和醫(yī)療數(shù)據(jù)使得醫(yī)療的研究和應(yīng)用進(jìn)程不斷加速。近年來，以人工智能和機(jī)器學(xué)習(xí)為首的*技術(shù)讓軟件變得越來越智能和獨(dú)立，不斷加速著健康領(lǐng)域的創(chuàng)新步伐，也使得業(yè)界得以在以下這些領(lǐng)域展開一系列變革：個人基因藥物研發(fā)新疾病的診斷和控制這些技術(shù)為醫(yī)療健康領(lǐng)域帶了巨大的發(fā)展機(jī)會，在某一個細(xì)分領(lǐng)域擁有差異化和高附加值產(chǎn)品的企業(yè)

ELISA試劑盒試驗(yàn)測定標(biāo)本分解2017/03/14: ELISA試劑盒試驗(yàn)測定標(biāo)本分解（1）標(biāo)本溶血ELISA試劑盒由于各種人為要素致使的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA測定中，會致使非特異性顯色，煩擾測定作用。為打敗上述煩擾作用，標(biāo)本搜集時有必要留心避免溶血。（2）標(biāo)本受細(xì)菌污染因菌體中或許富含內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而煩擾測定作用。（3）標(biāo)本保存不當(dāng)ELISA試劑盒在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中IgG可聚構(gòu)成多聚體

ELISA試劑盒各個操作步驟的留意關(guān)鍵2017/03/06: ELISA試劑盒各個操作步驟的留意關(guān)鍵在運(yùn)用前與室溫平衡，再進(jìn)行測定。在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶物后?？乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時刻，這一保溫進(jìn)程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的時機(jī)，只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。如果對試劑預(yù)備不太留意，在試驗(yàn)時

為什么步行時間多了住院時間自然就減少了？2017/02/22: 為什么步行時間多了住院時間自然就減少了？作為一名全科醫(yī)生（GP，generalpractitioner），在我（原文筆者）的從業(yè)實(shí)踐中，我對一些雖然已經(jīng)80歲但依然充滿活力的老年人印象非常深刻，盡管這個年齡會讓他們多病纏身，因此2005年，當(dāng)紐卡斯?fàn)柎髮W(xué)對55-80歲的人群進(jìn)行了一項(xiàng)健康研究時，我就更加確定我們對參與者體育運(yùn)動進(jìn)行的詳細(xì)細(xì)節(jié)記錄了。10年過去了，如今我們在澳洲醫(yī)學(xué)期刊（MedicalJournalofAustralia）上發(fā)表了一篇研究論文，報告了個體進(jìn)行體育運(yùn)動對其醫(yī)療護(hù)理需求

體育活動或可以防止兒童患抑郁癥2017/02/10: 體育活動或可以防止兒童患抑郁癥過去的研究已經(jīng)表明體育活動活躍的成年人患抑郁癥的風(fēng)險較低。但是還沒有研究探索相同的效應(yīng)是否在兒童身上也存在。日前，一項(xiàng)新研究的結(jié)果表明活躍的兒童患抑郁的風(fēng)險也較低。當(dāng)然這里指的是中度或者劇烈的可以讓兒童出汗或者是氣喘吁吁的體育活動。來自挪威科技大學(xué)（NTNU）的研究人員在長達(dá)四年的時間里追蹤研究了數(shù)百名兒童，以確定他們的體育活動與抑郁癥風(fēng)險之間的關(guān)系。打鬧的好處研究人員在800名兒童6歲時開始了實(shí)驗(yàn)，并在他們8歲和10歲時對其中700名兒童進(jìn)行了追蹤調(diào)查。他們通過*

將細(xì)胞外膜泡重新改造為智能納米級治療藥物2017/01/17: 將細(xì)胞外膜泡重新改造為智能納米級治療藥物在過去十年中，細(xì)胞外囊泡（EV）已經(jīng)作為用于治療一系列疾?。òò┌Y、心肌梗死和炎性疾?。┑年P(guān)鍵無細(xì)胞策略出現(xiàn)。事實(shí)上，該領(lǐng)域正快速從有希望的體外結(jié)果轉(zhuǎn)向體內(nèi)動物模型和早期臨床研究。這些研究利用了EV的高物理化學(xué)穩(wěn)定性和生物相容性以及它們通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和膜融合參與細(xì)胞細(xì)胞間交流的先天能力。來自倫敦帝國理工學(xué)院的研究人員近日在ACSNano雜志上發(fā)表綜述，重點(diǎn)討論了通過化學(xué)或生物學(xué)方法修飾EV以拓寬、改變或增強(qiáng)其治療能力的方法。他們研究了兩個廣泛使用的策略，已

鑒定出負(fù)責(zé)啟動和促進(jìn)多種腫瘤轉(zhuǎn)移的細(xì)胞2016/12/28: 鑒定出負(fù)責(zé)啟動和促進(jìn)多種腫瘤轉(zhuǎn)移的細(xì)胞在一項(xiàng)新的研究中，西班牙研究人員通過一種特定的被稱作蛋白CD36的標(biāo)志物鑒定出轉(zhuǎn)移起始細(xì)胞（metastasis-initiatingcell）。這種在腫瘤細(xì)胞膜中發(fā)現(xiàn)的蛋白負(fù)責(zé)攝取脂肪酸。CD36活性和對脂質(zhì)代謝的依賴性可將轉(zhuǎn)移起始細(xì)胞與其他的腫瘤細(xì)胞區(qū)分開來。相關(guān)研究結(jié)果于2016年12月7日在線發(fā)表在Nature期刊上，論文標(biāo)題為“Targetingmetastasis-initiatingcellsthroughthefattyacidrecepto

中美科學(xué)家提出癌癥協(xié)同治療新方法2016/12/22: 中美科學(xué)家提出癌癥協(xié)同治療新方法如今，裝載著一種氨基酸而配備著一種酶的生物相容性納米膠囊將兩種抗腫瘤策略結(jié)合到一種協(xié)同治療概念中。研究人員希望這會增加療效和降低副作用。在一項(xiàng)新的研究中，他們解釋了這一概念：腫瘤細(xì)胞被剝奪它們的營養(yǎng)物葡萄糖，這是因?yàn)樗晦D(zhuǎn)化為毒性的一氧化氮（NO）和過氧化氫（H2O2）。相關(guān)研究結(jié)果于2016年12月9日在線發(fā)表在AngewandteChemie期刊上，論文標(biāo)題為“Glucose-ResponsiveSequentialGenerationofHydrogenPe

WPMY-1細(xì)胞-WPMY-1細(xì)胞2016/12/14: WPMY-1細(xì)胞-WPMY-1細(xì)胞細(xì)胞名稱：WPMY-1人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞組織來源：正常前列腺基質(zhì)培養(yǎng)條件：貼壁；成肌纖維細(xì)胞樣形態(tài)：DMEM+5%FBS背景：肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株,WPMY-1,與RWPE-1細(xì)胞一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過一個pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu)，用SV40大T抗原對基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞，與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣，屬于來源于同一個前列腺的一系列細(xì)胞株。由于它們來源于同一個前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-1細(xì)胞

BSA 分類2016/11/23: 牛血清白蛋白Albuminfrombovineserum，BSA，又稱為組分V或CohnV，名稱起源于BSAzui早的分餾法——Cohn冷乙醇法，Cohn冷乙醇法zui早是由哈佛大學(xué)EdwinCohn教授于1946年發(fā)明的。當(dāng)時基于戰(zhàn)爭創(chuàng)傷治療對注射級別蛋白的大規(guī)模需求，Cohn教授在較低的溫度下改變血漿的乙醇濃度和pH值，使其所含蛋白在不同乙醇濃度下析出，在第五個析出的組分中主要成分為BSA，所以BSA又稱組分V或CohnV。Cohn法仍然是目前非常普遍的BSA分餾法。美國zui大的生物原材料

抗體沒做預(yù)試，用什么樣的稀釋度比較好呢？2016/11/18: 抗體沒做預(yù)試，用什么樣的稀釋度比較好呢？不同抗體，即使是同一公司的抗體，其的抗體稀釋度也是不一樣的，需要你實(shí)驗(yàn)摸索。我覺得轉(zhuǎn)膜過夜好像沒有必要吧，轉(zhuǎn)膜的目的也就是將蛋白轉(zhuǎn)到膜上就行啦，何必浪費(fèi)時間呢。至于具體的轉(zhuǎn)膜時間，還要看你的目的蛋白分子量的大?。晦D(zhuǎn)膜的設(shè)備，是半干式，還是濕式。一抗當(dāng)然可以過夜，如果你想所短WesternBlot時間的話，可以增高一抗的孵育溫度，我們實(shí)驗(yàn)室一般37度，兩小時就足夠了；你可以參照抗體說明書。至于一抗和二抗得稀釋度，你可以一抗1：1500；二抗1：20000試試

各種白介素的作用2016/11/10: 各種白介素的作用[各種白介素的作用]目前發(fā)現(xiàn)了29個白細(xì)胞介素(后為35個)，分別命名為IL-1---IL29.功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊。(一)IL-1(又稱淋巴細(xì)胞刺激因子)1.細(xì)胞來源主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。2.存在形式IL-1α和IL-1&[白介素的作用Il細(xì)胞細(xì)胞增殖細(xì)胞因子]目前發(fā)現(xiàn)了29個白細(xì)胞介素(后為35個)，分別命名為IL-1---IL29.功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊。(一)IL-1(又稱淋巴細(xì)胞刺激因子)1.細(xì)胞來源主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。2.存

細(xì)胞凋亡的早期檢測方法介紹2016/11/03: 細(xì)胞凋亡的早期檢測方法介紹1、PS（磷脂酰*）在胞外膜分布的檢測PS從胞膜內(nèi)側(cè)轉(zhuǎn)移到外側(cè)現(xiàn)象是在細(xì)胞凋亡的早期即可發(fā)生標(biāo)志。AnnexinV是一種鈣依賴性的磷脂結(jié)合蛋白，能專一性的結(jié)合暴露在胞膜外側(cè)的PS，使用熒光素標(biāo)記的AnnexinV蛋白（如AnnexinV-FITC）即可檢測細(xì)胞凋亡。由于這是一種凋亡早期的活細(xì)胞檢測（懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞都適用），可與DNA染料或別的晚期檢測方法相結(jié)合來標(biāo)記凋亡的發(fā)展階段。操作簡便快速，10分鐘就可完成檢測。靈敏度高，可作為流式方法分析凋亡細(xì)胞的基礎(chǔ)。2、細(xì)

細(xì)胞株的保存方法介紹2016/11/03: 細(xì)胞株的保存方法介紹1.紫外消毒30min后關(guān)閉紫外燈，開啟超凈臺正常工作狀態(tài)，用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培養(yǎng)基，*確保瓶身干凈后放于工作臺面內(nèi)，點(diǎn)燃酒精燈，將培養(yǎng)基和*瓶口用酒精棉球擦拭后，再將瓶口對準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次，旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋，分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上，瓶口對準(zhǔn)酒精燈，且放在距離酒精燈zui近的位置，瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。3.將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次，旋開后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次，蓋放于酒精燈右側(cè)后將培養(yǎng)瓶內(nèi)

科學(xué)家成功修復(fù)小鼠受損視神經(jīng)2016/10/31: 近日，在斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院*下，研究人員成功修復(fù)了哺乳動物的部分關(guān)鍵視神經(jīng)。該研究報告被發(fā)表在《NatureNeuroscience》期刊的在線上。科學(xué)家讓小鼠的視神經(jīng)（負(fù)責(zé)將視覺信息從眼睛傳遞到大腦）在被*切斷之后，成功實(shí)現(xiàn)了再生，并發(fā)現(xiàn)視神經(jīng)可以重新沿襲之前的路徑，重建與大腦合適部位的。這項(xiàng)*的修復(fù)工作或能幫助盲人重見光明。在科學(xué)家重建小鼠的視神經(jīng)之前，小鼠的癥狀類似于人類的青光眼，這是除白內(nèi)障之外的第二大致盲原因。該研究的作者、神經(jīng)生物學(xué)副教授安德魯.休伯曼（AndrewHuberman）指

清華大學(xué)Cell子刊發(fā)布重要免疫成果2016/10/28: 來自清華大學(xué)、中國科技大學(xué)等處的研究人員證實(shí)，自我特異性激活受體SLAM家族對于NK細(xì)胞馴化（Education）至關(guān)重要。這一研究發(fā)現(xiàn)發(fā)布在8月9日的《免疫》（Immunity）雜志上。清華大學(xué)的董忠軍（ZhongjunDong）教授及中國科技大學(xué)的田志剛（ZhigangTian）教授是這篇論文的共同通訊作者。前者的主要研究興趣包括：NK細(xì)胞發(fā)育過程相關(guān)的信號途徑；NK細(xì)胞是如何在分子和細(xì)胞水平功能獲得成熟；驅(qū)動NK細(xì)胞分化和活化的分子基礎(chǔ)。田志剛教授則主要從事天然免疫和肝臟免疫學(xué)研究。NK細(xì)

ELISA技術(shù)試劑的選擇2016/10/26: ELISA技術(shù)試劑的選擇在臨床檢驗(yàn)中一般采用商品試劑盒進(jìn)行測定。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；（6）洗滌液；（7）酶反應(yīng)終止液。1、免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫（2~8℃）干燥的條件下一般可保存6個月。有些不完

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