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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)0
所 在 地上海
更新時間:2022-08-12 11:22:55瀏覽次數(shù):210次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工機械設(shè)備網(wǎng)1.裂解細胞提取總蛋白質(zhì),主要用于Western,免疫沉淀。
2.主要由NP-40、脫氧膽酸鈉、磷酸鈉、SDS、EDTA、蛋白酶抑制劑等。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白樣品,可以用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
3.—20℃,12個月
使用方法:
對于組織樣品:
1.組織塊用冷PBS洗滌,去除血污。剪成小塊置于勻漿器中。
2.加入10倍組織體積本試劑(使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)使用高速組織研磨儀*勻漿。
3.將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管中,振蕩。冰浴30 min,期間用移液器反復(fù)吹打,確保細胞*裂解。
4.12000g離心5 min,收集上清,即為總蛋白溶液。
對于培養(yǎng)細胞樣品:
1.對于貼壁細胞:
(1)用PBS沖洗細胞2-3次。后一次*吸干殘留液。
(2)加入適當(dāng)體積的本試劑(使用前數(shù)分內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)于培養(yǎng)板、瓶內(nèi)3-5 min。期間反復(fù)晃動培養(yǎng)板、瓶,使試劑與細胞充分接觸。
(3)用細胞刮刀將細胞及試劑刮下,收集到1.5mL離心管中。
2.對于懸浮細胞:離心收集細胞,每6孔板細胞加約250 μL本試劑(在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑),振蕩。
3.冰浴30 min,期間每10 min用200 μL移液器反復(fù)吹打數(shù)次,確保細胞*裂解。
4.12000g離心5 min,收集上清,即為總蛋白。
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