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初級(jí)會(huì)員 | 第5年

86-021-65681082

生化試劑盒
熒光染料
其他
ELISA 試劑盒
耗材
外包服務(wù)
甲苯胺藍(lán)染色 細(xì)胞石蠟包埋 天狼猩紅染色 骨組織脫鈣(普通、小鼠、大鼠) 油紅O染色 冰凍切片 阿利新藍(lán)染色 骨組織脫鈣(人、兔、豬等) PASM 六胺銀染色 普魯士藍(lán)染色 瓊脂包埋 HPLC檢測(cè)系列 生化檢測(cè) 普通PCR micRNA檢測(cè) TUNEL(熒光) 激光共聚焦拍照 [動(dòng)物實(shí)驗(yàn)] - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù) [免疫熒光/IF] - FJB染色 超薄切片(透射電鏡) 原位雜交(紅色熒光單標(biāo)) 原位雜交(DAB顯色) 原位雜交(綠色熒光單標(biāo)) 免疫熒光(單標(biāo)) 免疫熒光(雙標(biāo)) WB(普通蛋白,磷酸化蛋白)) 樹脂包埋(透射電鏡) real-time PCR 引物合成 WB(核蛋白、線粒體蛋白、膜蛋白) 透射電鏡全套 生化 養(yǎng)分檢測(cè) 植物元素 理化性質(zhì) 農(nóng)藥殘留 氨基酸組分 脂肪酸組分 AB-PAS染色 TTC染色(梗死) 麥胚凝集素(WGA)熒光染色 鋨酸染色 組織芯片切片 半薄切片 EVG染色 PAS糖原染色 番紅-固綠染色(植物) 組織石蠟包埋 苯胺藍(lán)染色 植物標(biāo)本軟化(種子、硬枝) 植物標(biāo)本軟化(普通根、莖) 石蠟切片 組織芯片制作 普通切片掃描 亞甲基藍(lán)染色 番紅-固綠染色(軟骨) OCT包埋 多層掃描(高爾基染色片) 高爾基染色 movat五色染色 ROS活性氧檢測(cè) ALP堿性磷酸酶染色 ATP染色 β-半乳糖苷酶染色 Trap染色 PAS-萘酚磺S染色 茜素紅染色 快速革蘭氏染色 剛果紅染色 kuweisuan品紅VG染色 肥大細(xì)胞染色 尼氏染色 瑞士吉姆薩染色 LFB髓鞘染色 HE染色 masson染色

ELISA法手工測(cè)定的影響因素

時(shí)間:2022/8/12閱讀:416
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      ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn),并具有操作簡(jiǎn)便、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn),因而多年來廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室中,但在測(cè)定中常會(huì)出現(xiàn)一些誤差和問題。我們通過幾年的實(shí)驗(yàn)觀察,認(rèn)為影響結(jié)果的因素有如下方面。

 

1  試劑盒

        (1)抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高,對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽性。

       (2)酶結(jié)合物濃度過高,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。

 

2  試驗(yàn)儀器

      (1)加樣器是否經(jīng)過校正,酶免測(cè)定血清用血量很少,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不精確,會(huì)使結(jié)果忽高忽低。

      (2)每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無堵塞。

 

3  操作

    (1)檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低。

    (2)加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    (3)洗滌不充分,會(huì)使結(jié)果假性增高,過分洗滌呈假陰性。

    (4)比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高。

    (5)抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,依賴于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,影響反應(yīng)速度??傊捎贓LISA實(shí)驗(yàn)的影響因素較多,在實(shí)際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),避免和排除各種因素的影響,使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。

 

 

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