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生化試劑盒
熒光染料
其他
ELISA 試劑盒
耗材
外包服務(wù)
甲苯胺藍染色 細胞石蠟包埋 天狼猩紅染色 骨組織脫鈣(普通、小鼠、大鼠) 油紅O染色 冰凍切片 阿利新藍染色 骨組織脫鈣(人、兔、豬等) PASM 六胺銀染色 普魯士藍染色 瓊脂包埋 HPLC檢測系列 生化檢測 普通PCR micRNA檢測 TUNEL(熒光) 激光共聚焦拍照 [動物實驗] - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù) [免疫熒光/IF] - FJB染色 超薄切片(透射電鏡) 原位雜交(紅色熒光單標(biāo)) 原位雜交(DAB顯色) 原位雜交(綠色熒光單標(biāo)) 免疫熒光(單標(biāo)) 免疫熒光(雙標(biāo)) WB(普通蛋白,磷酸化蛋白)) 樹脂包埋(透射電鏡) real-time PCR 引物合成 WB(核蛋白、線粒體蛋白、膜蛋白) 透射電鏡全套 生化 養(yǎng)分檢測 植物元素 理化性質(zhì) 農(nóng)藥殘留 氨基酸組分 脂肪酸組分 AB-PAS染色 TTC染色(梗死) 麥胚凝集素(WGA)熒光染色 鋨酸染色 組織芯片切片 半薄切片 EVG染色 PAS糖原染色 番紅-固綠染色(植物) 組織石蠟包埋 苯胺藍染色 植物標(biāo)本軟化(種子、硬枝) 植物標(biāo)本軟化(普通根、莖) 石蠟切片 組織芯片制作 普通切片掃描 亞甲基藍染色 番紅-固綠染色(軟骨) OCT包埋 多層掃描(高爾基染色片) 高爾基染色 movat五色染色 ROS活性氧檢測 ALP堿性磷酸酶染色 ATP染色 β-半乳糖苷酶染色 Trap染色 PAS-萘酚磺S染色 茜素紅染色 快速革蘭氏染色 剛果紅染色 kuweisuan品紅VG染色 肥大細胞染色 尼氏染色 瑞士吉姆薩染色 LFB髓鞘染色 HE染色 masson染色

茁彩生物 通用的樣本處理方法

時間:2022/8/12閱讀:323
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  • 土壤:

    稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標(biāo)本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。

  • 糞便:

    稱取1g糞便,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標(biāo)本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。

  • 咽拭子:

    加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干液體,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內(nèi)蛋白,要破碎細胞。

  • 植物標(biāo)本(精提):
    1、 稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;
    2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過夜;
    3、 于4度,8000rpm,離心20分鐘,取上清;
    4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用甲醇(5ml)洗柱→乙醚(5ml)洗柱→甲醇(5ml)洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存?zhèn)溆茫?br />5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容)。混勻后室溫放置30分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。

  • 植物標(biāo)本(推薦):

    用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留物質(zhì)(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。last將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。

  • 牛奶:

    用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  • 蜂蜜:

    用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  • 培養(yǎng)的細胞:

    A、動物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融(如果反復(fù)凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

    B、植物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設(shè)置破碎2s,冷卻30s的方式,充分破碎細胞,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

    C、組織的細胞切割標(biāo)本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。

  • 尿液:

    用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  • 胸腹水

    用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  • 腦脊液:

    用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

     

  • 樣本收集注意事項:

    1、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    2、標(biāo)本采集后盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    3、我們羅列的是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發(fā)表的文獻,自行設(shè)計合理的樣本處理方法。

 

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