胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)常用的添加物, 目前享有盛譽(yù)的Life等品牌的胎牛血清價(jià)格飛漲,500ML從原來的3000-4000元漲到現(xiàn)在7000-8000元,給很多科研單位或機(jī)構(gòu)造成了巨大的壓力,不管是科研單位還是經(jīng)銷商都費(fèi)勁心機(jī)儲備高質(zhì)量的進(jìn)口血清。然而前期儲備的較低價(jià)格的進(jìn)口血清總有用完的一天, 因此國內(nèi)相關(guān)單位非常關(guān)注尋求新型的細(xì)胞培養(yǎng)基。 但并不是所有的細(xì)胞培養(yǎng)需要高質(zhì)量的胎牛血清, 而且市場上有些培養(yǎng)基*可以替代昂貴的Life等品牌血清。

筆者對哺乳細(xì)胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基的選擇總結(jié)如下心得,以供大家參考:
1) 腫瘤細(xì)胞系及懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基選擇
腫瘤細(xì)胞系是容易飼養(yǎng)的細(xì)胞,對胎牛血清要求不高,甚至用新生牛血清就可以了,沒有必要用高質(zhì)量的Life或澳洲胎牛血清。比如,四季青、吉泰、WHB等國產(chǎn)牌子的血清*可以勝任。 對于CHO懸浮細(xì)胞,甚至不用添加血清,選擇將DMEM作為基本培養(yǎng)基,并添加培養(yǎng)細(xì)菌用的有酵母抽提物或植物抽提物就*可以勝任,超便宜,可以配500 ML不會超過100元。
2) 原代哺乳細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇
對于需要擴(kuò)增的原代哺乳細(xì)胞,比如培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞,可選擇ScienCell的相關(guān)培養(yǎng)基也要比用Life的血清要便宜。還有一種選擇就是選擇遠(yuǎn)慕生物的AdvCell哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增培養(yǎng)基,這款培養(yǎng)基特異為原代哺乳細(xì)胞分離及快速擴(kuò)增而設(shè)計(jì),配有預(yù)選的基本培養(yǎng)基以及血清,并添加有一些細(xì)胞因子以彌補(bǔ)血清質(zhì)量差異所造成的影響。這款培養(yǎng)基尤其對于一些擴(kuò)增速度較慢的原代哺乳細(xì)胞非常有效,比如對培養(yǎng)原代成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等,效果較好。
在制備轉(zhuǎn)基因小型豬的過程中曾用它來培養(yǎng)增長速度及其慢的豬成纖維細(xì)胞時(shí),我們發(fā)現(xiàn)若用常規(guī)培養(yǎng)基,即使用Life的血清也需一個(gè)月細(xì)胞密度才能達(dá)到80% Confluence,而若用AdvCell哺乳細(xì)胞快速擴(kuò)增培養(yǎng)基,1個(gè)星期細(xì)胞就能達(dá)到80% confluence, 而且擴(kuò)增出來的細(xì)胞核型一點(diǎn)問題都沒有,因?yàn)槲覀兂晒Φ赝ㄟ^核移植獲得了轉(zhuǎn)基因小型豬。
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