主要用途
細(xì)胞糖胺多糖(GAG)總含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法定量檢測試劑是一種旨在通過高鹽萃取可溶性糖胺多糖,與二甲基亞甲基藍(lán)染料結(jié)合,在丙醇解離溶液中,釋放紫紅色染料,由分光光度儀比色分析,定量檢測細(xì)胞樣品中糖胺多糖含量的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種人體或動(dòng)物細(xì)胞(皮膚、肌肉、軟骨、腫瘤)等糖胺多糖水平檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測準(zhǔn)確。
技術(shù)背景
糖胺多糖(glycosaminoglycan;GAG),又稱為粘多糖(mucopolysaccharide),是體內(nèi)zui為豐富的異源多聚糖。糖胺多糖是一種未分叉的負(fù)電荷性長鏈多聚糖,由重復(fù)的二糖單位,包括六碳糖(hexose)或己糖醛酸(hexuronic acid),鏈接到己糖胺(hexoamine)上而成。糖胺多糖與核心蛋白(core protein)共價(jià)相聯(lián),構(gòu)成蛋白多糖(proteoglycan;PG),成為細(xì)胞膜和細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix;ECM)的主要成分。蛋白多糖的糖胺多糖在合成過程中發(fā)生硫酸酯化(sulfated group),其部位在O或N位上,有利于發(fā)揮各種不同的作用,包括酶的調(diào)節(jié)、細(xì)胞黏附、生長、遷移、分化,以及組織損傷反應(yīng)?;谔前范嗵堑母叨蓉?fù)電荷的特點(diǎn),使用異染性(metachromatic)陽離子藍(lán)色染料二甲基亞甲基藍(lán)(1,9-dimethylmethylene blue;DMMB),在酸性條件下,特異性的結(jié)合產(chǎn)生不溶性紫色或粉紅色糖胺多糖染料復(fù)合物(Dye-GAG complex),在丙醇解離溶液中,釋放出染料,通過分光光度儀(656nm波長)測定,來定量分析糖胺多糖的總含量。
用戶自備
1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
細(xì)胞刮脫棒:用于細(xì)胞脫離
恒溫水槽或干式恒溫儀:用于樣品反應(yīng)
微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作
比色皿或96孔板:用于比色分析的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于比色分析
注意事項(xiàng)
1.本產(chǎn)品為25次操作,包括標(biāo)準(zhǔn)樣品
2.本產(chǎn)品不適合于非硫酸酯化的二糖降解片段、透明質(zhì)酸(hyaluronate)的檢測
3.本產(chǎn)品可以檢測*(chondroitin sulfate)、硫酸角質(zhì)素(keratan sulfate)、硫酸皮膚素(dermatan sulfate)、硫酸類肝素(heparan sulfate)等主要糖胺多糖
4.本產(chǎn)品檢測范圍為0.2至5微克糖胺多糖
5.操作時(shí),須戴手套
6.系統(tǒng)操作時(shí),標(biāo)準(zhǔn)樣品測定只需1次
7.空白對(duì)照讀數(shù)通常小于0.06,如果超過表明抽去上清操作不當(dāng)
8.孵育時(shí),避免光照
9.如果樣品糖胺多糖含量過低,可以濃縮樣品或增加樣品量至100微升
10.樣品濃度可以表述為:微克糖胺多糖/細(xì)胞量;微克糖胺多糖/細(xì)胞總蛋白等
11.本公司提供系列糖類代謝檢測試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感
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