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 凍干新鮮補體豚鼠血清的正確運用

信帆生物供應凍干新鮮補體豚鼠血清，產(chǎn)品備有大量現(xiàn)貨，質(zhì)量穩(wěn)定，深受廣大科研用戶青睞！

 補體結(jié)合試驗(complement fixation test，CFT)該試驗是在補體參與下，以綿羊紅細胞和溶血素作為指示系統(tǒng)，來檢測未知的抗原或抗體的血清學試驗。有五種成分參與，分為指示系統(tǒng)和待檢系統(tǒng)(已知抗原和未知抗體或已知抗體和未知抗原)。補體用新鮮豚鼠血清。方法是將已知的抗原或抗體與未知標本(可能含相應抗體或抗原)充分混合，再加入補體作用一段時間，后加入指示系統(tǒng)。若待檢系統(tǒng)有相應抗體或抗原，則能形成抗原抗體復合物，從而消耗了補體不出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，此為陽性；相反，出現(xiàn)溶血則為陰性。補體結(jié)合試驗的影響因素較多，正式試驗前需對已知成分作一系列滴定，尤其是補體，應選擇適宜的量參與反應，避免假性結(jié)果。每次試驗尚需同時設(shè)立多種對照，以作為判斷結(jié)果可靠性的依據(jù)。該法對顆粒性或可溶性抗原均適用，臨床上常用于檢測某些病毒、立克次氏體和螺旋體感染者血清內(nèi)的中的抗體，亦可用于某些病毒的分型。

補體結(jié)合，利用抗原抗體復合物同補體結(jié)合，把含有已知濃度的補體反應液中的補體消耗掉使?jié)舛葴p低的現(xiàn)象，以檢出抗原或抗體的試驗。首先將經(jīng)過56℃處理30分鐘使補體滅活的抗血清，與抗原及補體（通常將豚鼠血清作適當稀釋后使用）混合使起反應。第二是加入已同抗綿羊紅細胞抗體相結(jié)合的綿羊紅細胞（致敏紅細胞）。在初階段對消耗補體建立起足夠的抗原抗體反應時，沒有發(fā)生致敏紅細胞的溶血，但補體剩余下來則引起溶血反應。

 

一、血清制備 由于豚鼠血清中，含有對人精有毒性的物質(zhì)，因此用作補體的豚鼠血清，應在合并之前逐只檢查，僅把無精制動作用的豚鼠血清合并，用溶血反應測定血清的補體效價(C'H)，以無精制動作用的未婚女性血清，調(diào)整補體效價為 200C'H 左右，確保制動反應系統(tǒng)有足夠的補體量(10C'H)參與。豚鼠血清以 0.5mL 分裝于小試管內(nèi)，置 - 70℃保存?zhèn)溆?。?/span>

(1) 作補體用的豚鼠血清制備：一次用10-15只豚鼠，分別從心臟采血，低溫下分離血清，分別以精制動試驗檢測對人精有無毒性，具體方法如下。

?、?試驗組：　處女血清 0.25mL　精懸浮液(40×106/mL) 0.025mL} 32℃/60min精活動率(T% )　待檢豚鼠血清 0.05mL

?、?對照組：　處女血清 0.25mL　精懸浮液(40×106/mL) 0.025mL } 32℃/60min 精活動率(C%)　滅活豚鼠血清(或不加豚鼠血清) 0.05mL　兩者比較 C/T≥1.2 判為有毒性，<1.2 判為無毒性?！“?1.2以下的豚鼠血清合并后，再測補體效價。　此外有人用 AB 血型的人血清作補體，不過 AB 血型人血清的補體效價比豚鼠血清要低得多，反應系統(tǒng)加入 0.05mL 血清仍不能充分把制動抗體檢出，因此一般不采用。　

二、精洗滌 精采用丈夫或他人的都可以，都能取得相同的結(jié)果。但由于不孕婦女血中的精制動抗體多數(shù)是由精漿抗原所產(chǎn)生的抗體，精漿有中和抗體的作用，會影響測定的結(jié)果。所以制備精懸液時，首先要用 10% 家兔滅活血清洗滌精，盡可能把精漿成分除去，以免降低精制動抗體的效價。

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