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1、齦溝液（GCF）的收集及處理分別預(yù)備4 條2 mm×10 mm 3MM 濾紙條(Whatman,英國(guó))放入已編號(hào)的Eppendorf 管中，取樣前半小時(shí)用AE 240 電子天平
稱(chēng)重并記錄。受試者漱口、隔濕取樣牙，去除齦上菌斑和牙石，輕輕吹干牙面。每顆牙4 個(gè)取液區(qū)，將濾紙條插入唇舌側(cè)(*)和近遠(yuǎn)中(從唇側(cè)斜向插入)
齦溝中，直至遇到輕微阻力為止，30 s 后取出，立即放回原Eppendorf 管中。若被唾液或者血液污染則重取。再次用電子天平稱(chēng)重，兩者之差即為GCF 的
質(zhì)量。稱(chēng)重后將Eppendorf 管封口，放入低溫冰箱內(nèi)，-70 ℃保存。樣本測(cè)試前解凍，按所得差值用去離子水稀釋100 倍后，以13 000 r /min 低溫離心20
min，取上清液備測(cè)。
2、比較whatman3MM層析濾紙和whatman3#定性濾紙?jiān)谑占l溝液及蛋白萃取方面的性能,為臨床研究中選用合適濾紙采集齦溝液提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:A組用whatman3MM層析濾紙,B組用whatman3#定性濾紙,手工裁剪成2mm×8mm大小的濾紙條。2組分別加入15個(gè)體積遞增的血清品紅溶液,同體積重復(fù)4次,測(cè)量每張濾紙條上的溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度。2組分別加入5個(gè)體積遞增的正常人血清,同體積重復(fù)5次,測(cè)定各組萃取液的總蛋白濃度;A、B 2組分別加入用0.9%NaCl溶液等倍稀釋獲得的5種濃度的正常人血清溶液1μL,同濃度重復(fù)5次,測(cè)定各組萃取液的總蛋白濃度。使用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較兩者差異。結(jié)果:2組溶液浸潤(rùn)長(zhǎng)度與溶液體積均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,差異有顯著性(P0.05)。除體積為0.1μL時(shí),A組濾紙條上的溶液平均浸潤(rùn)長(zhǎng)度均大于B組。蛋白萃取性能比較中,2組無(wú)顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:2種濾紙均可對(duì)齦溝液在濾紙條上的遷移距離及其所采集的齦溝液進(jìn)行定量。當(dāng)齦溝液分泌量較大時(shí),whatman3#定性濾紙較3MM層析濾紙更為適用。兩者的蛋白萃取性能無(wú)顯著差異。 

3、牙周袋臨床指標(biāo)和齦溝液的測(cè)定: 由同一名醫(yī)師完成術(shù)前、術(shù)后的每次臨床檢查,用標(biāo)準(zhǔn)刻度探針測(cè)定牙周袋深度,所有探診檢查均使用Michigan 探診,牙周袋深度取測(cè)定牙的頰側(cè)近中、*、遠(yuǎn)中及舌側(cè)*的牙周袋深度均值,在隔濕,吹干后用Whatman 號(hào)濾紙制成2 mm ×20 mm 的濾紙條插入牙周袋內(nèi)2 min ,取出后用游標(biāo)卡尺測(cè)量其浸潤(rùn)面積,換算成齦溝液量。