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果糖fructose 含量檢測試劑盒資料
閱讀：289 發(fā)布時間：2018-9-26For Research Use Only
僅供研究用
貨號：QYS-234052
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
果糖是一種zui為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結合生成蔗糖。果糖是zui甜的單糖，廣泛應用于食品、醫(yī)藥、保健品生產中。
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書測定原理：
在酸性條件下果糖與*反應，生成有色物質，在 480nm 下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100ml×1 瓶，4℃保存；
試劑一：1mg/mL 標準液 10mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 40ml×1 瓶，4℃保存；
試劑三：液體 15ml×1 瓶， 4℃保存；
試劑四：粉劑 0.5g×1 瓶，常溫保存。
果糖提取：
稱取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎；加入 1mL 提取液，適當研磨后快速轉移到有蓋離心管中；置于 80℃水浴鍋中 10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩 3~5 次，冷卻后，4000g，25℃離心 10min，取上清；加入少量（約 2mg）試劑四，80℃脫色 30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入 1mL 提取液，4000g，25℃離心 10min，取上清液測定。
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書測定步驟：
1、 分光光度計預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 480nm，蒸餾水調零。
2、樣本測定（在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL） 空白管 標準管 測定管
樣本 100
試劑一 100
蒸餾水 100
試劑二 700 700 700
試劑三 200 200 200
混勻，95℃水浴反應 30min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后測定 480nm 處光吸收值，空白管、標準管和測定管分別記為 A1、A2 和 A3。
果糖含量計算：
1、果糖含量（mg/mg prot）=（C 標準管×V1）×(A3－A1)÷(A2－A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷
（A2-A1) ÷Cpr
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書此法需要自行測定蛋白濃度。
2、果糖含量(mg/g 鮮重）=（C 標準管×V1）×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C 標準管：標準管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，2mL；
Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
注意：zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot