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無(wú)菌室實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中必須遵守的條件!

閱讀:28          發(fā)布時(shí)間:2021-8-25

  無(wú)菌室實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中要注意什么?有哪些必須遵守的條件?今天就來(lái)跟大家詳細(xì)解答下!


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  一、無(wú)菌室的級(jí)別:

  根據(jù)空氣潔凈度的不同,無(wú)菌室可分為哪幾個(gè)級(jí)別一般情況下,無(wú)菌室的等級(jí)有百級(jí),千級(jí),萬(wàn)級(jí),十萬(wàn)級(jí),百萬(wàn)ji等等。

  凈化等級(jí)一般分為100級(jí)、1000級(jí)、10000級(jí)、100000級(jí),現(xiàn)在2010年版的GMP 凈化車(chē)間已經(jīng)不用這個(gè)叫法了,分為ABCD級(jí)別,分別相對(duì)應(yīng)于98版的幾個(gè)級(jí)別,通過(guò)檢測(cè)區(qū)域內(nèi)的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)、沉降均數(shù)評(píng)價(jià)凈化級(jí)別,各個(gè)級(jí)別 有不同的要求,凈化等級(jí)分靜態(tài)、動(dòng)態(tài)兩種。

  無(wú)菌室設(shè)計(jì)建設(shè)要點(diǎn):

  無(wú)菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整,不易藏污納垢,便于清洗。工作臺(tái)的臺(tái)面應(yīng)該處于水平狀態(tài)。無(wú)菌室和緩沖間都裝有紫外線(xiàn)燈,無(wú)菌室的紫外線(xiàn)燈距離工作臺(tái)面 1 米。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)穿滅過(guò)菌的服裝,戴帽子。

  當(dāng)前無(wú)菌室多存在于微生物工廠(chǎng),一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過(guò)電動(dòng)裝置使空氣通過(guò)高效過(guò)濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面,使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無(wú)菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。

  在條件較困難的地方,也可以用木制無(wú)菌箱代替超凈臺(tái)。

  無(wú)菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,便于移動(dòng),箱正面開(kāi)有兩個(gè)洞,不操作時(shí)用推拉式小門(mén)擋住,操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃,便于在內(nèi)部操作,箱內(nèi)部裝有紫外線(xiàn)燈,從側(cè)面小門(mén)可以放進(jìn)去器具和菌種等。

  二、無(wú)菌室操作規(guī)范

  1.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。

  2.嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。

  3.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。

  4.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。

  5.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。

  6.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。

  7.無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開(kāi)啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干,無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL,放至凝固后,倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),證明無(wú)菌后,取平板3-5個(gè),分別放置工作位置的左中右等處,開(kāi)蓋暴露30分鐘后,倒置于30-35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落,10000級(jí)潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度,應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行*消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。

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