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上海康朗生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品：ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，抗體，兔ELISA試劑盒，檢測(cè)試劑盒，重組蛋白，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，單克隆抗體，多克隆抗體，白介素試劑盒， 酶聯(lián) ... |
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2017-3-14 閱讀(181)
ELISA試劑盒試驗(yàn)測(cè)定標(biāo)本分解
（1）標(biāo)本溶血
ELISA試劑盒由于各種人為要素致使的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞損壞溶解時(shí)釋放出許多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，會(huì)致使非特異性顯色，煩擾測(cè)定作用。為打敗上述煩擾作用，標(biāo)本搜集時(shí)有必要留心避免溶血。
（2）標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中或許富含內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而煩擾測(cè)定作用。
（3）標(biāo)本保存不當(dāng)
ELISA試劑盒在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，血清中IgG可聚構(gòu)成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)致使本底過(guò)深、甚至形成假陽(yáng)性；標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（如一天以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾，ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集；如不能當(dāng)即測(cè)定，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)有些濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可劇烈振蕩。
（4）標(biāo)本凝聚不全
在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下，正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚，18~24h*凝聚。臨床查驗(yàn)工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間敏捷查看，常在血液還未初步凝聚時(shí)即強(qiáng)行離心分別血清，此刻的血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易形成假陽(yáng)性作用；這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查作用變?yōu)殛幮?。為避免上述煩擾作用，處理的方法是血液標(biāo)本搜集后有必要使其充分凝聚后再分別血清，或標(biāo)本搜集時(shí)用帶分別膠的*或于*中參與恰當(dāng)?shù)拇倌齽?br />（5）標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
ELISA試劑盒抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性）及敏捷分別血清的分別膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有一定煩擾作用。
通過(guò)以上的分析和總結(jié)，臨床查驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性等過(guò)錯(cuò)的作用，打掃ELISA試劑盒要素和操作要素，再有便是從標(biāo)本要素進(jìn)行分析，并應(yīng)采用相應(yīng)措施打掃煩擾，然后保證查看作用的準(zhǔn)確性。
