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腫瘤細胞檢測技術的進步——基于微流控技術的第四代循環(huán)腫瘤細胞分選技術

2021年06月29日 15:05人氣:119來源:國初科技(廈門)有限公司

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隨著對腫瘤轉(zhuǎn)移的深入研究,循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cell,CTC)已成為當前腫瘤學研究的熱點。在外周血中檢測循環(huán)腫瘤細胞是預示腫瘤早期轉(zhuǎn)移最直接的方法,在腫瘤早期轉(zhuǎn)移的臨床診斷中具有積極的意義。檢測循環(huán)腫瘤細胞可用來揭示腫瘤轉(zhuǎn)移行為、反映腫瘤的侵襲性,具有指導臨床個體化治療并對患者進行預后評估重大價值。
自1869年循環(huán)腫瘤細胞被提出,經(jīng)歷150年仍無法被廣泛應用于臨床,因為在1mL血液中,大約有5,000,000,000個血細胞,而CTC的含量往往只有1-50個。因此尋求穩(wěn)定、靈敏以及特異性高的檢測方法是解決 CTC檢測問題的關鍵。從技術發(fā)展來看,CTC分離富集技術分為四代:第一代為基于物理特性的粗分離技術,第二代為基于生化特性的免疫磁珠技術,第三代為基于物理特性的膜分離技術,第四代為微流控技術。
第一代分離技術,基于物理特性的粗分離技術通過特殊濾膜裝置、密度梯度離心將CTC分離出來。這些技術操作簡單成本低廉,不依賴細胞表面抗原的表達,捕獲的細胞數(shù)量多,但是由于CTC物理特性的異質(zhì)性,難以富集到高純度的CTC。
第二代分離技術,基于生化特性的免疫磁珠技術。有陽性選擇法和陰性選擇法。陽性選擇分離法即利用特異性的抗體“捕獲”腫瘤細胞。這種技術是將抗腫瘤細胞表面標志物的抗體包被在磁性小珠上,這樣不但可以利用抗原抗體結(jié)合來識別循環(huán)腫瘤細胞 (CTC),還可以用磁性“捕獲”患者血樣中的循環(huán)腫瘤細胞 (CTC),隨后通過磁場即可將磁珠捕獲與未捕獲的細胞分離。但是循環(huán)中的腫瘤細胞常是高度異質(zhì)性的,這時具有組織特異性的表面標志物的表達就會有所下調(diào)。這樣的結(jié)果就會導致一些變異的腫瘤細胞可以逃脫掉捕獲富集的過程,就會得到假陰性結(jié)果,從而導致錯誤的診斷。陰性選擇法是消減血中所有不需要的細胞,比如紅細胞和白細胞。這樣就能夠僅留下少量的含有循環(huán)腫瘤細胞 (CTC)的富集樣本。陰性富集法需要采用大量抗體,成本高,穩(wěn)定性差,難以保持CTC細胞活性,富集率及純度都較難保證。
第三代為基于物理特性的膜分離技術。根據(jù)循環(huán)腫瘤細胞直徑的大小,選用一定孔徑的膜進行分離。漏檢小粒徑腫瘤細胞尤其是腫瘤干細胞,而為了提高捕獲效率,則會殘留大量的背景細胞,對鑒定造成較大的難度。
第四代為微流控技術。根據(jù)腫瘤細胞的病理學定義—核質(zhì)比顯著高于正常細胞,采用基于細胞剛性程度、尺寸等物理特性的微流控芯片法,可實現(xiàn)非抗體依賴的CTC活性細胞無損捕獲,最大限度捕獲上皮來源、間質(zhì)來源以及干細胞來源所有表型循環(huán)腫瘤細胞。
國初科技(廈門)有限公司大力推廣第四代微流控循環(huán)腫瘤細胞分選技術,該技術采用光刻技術、高分子材料合成技術、等離子鍵合技術、微流體技術、仿生技術、精準控制技術等六大工藝技術打造,具有操作簡單、富集率高、純度高等優(yōu)點。第四代微流控循環(huán)腫瘤*可實現(xiàn)CTC高效、無標記、無損分離。分選樣品量只需5ml全血,腫瘤細胞收率>95%,紅細胞去除率接近100%,白細胞去除率>99.9%,分離時間僅需20分鐘,全程自動化操作,無需專業(yè)人員。
 
第四代微流控循環(huán)腫瘤*富集無標記、完整活性細胞,可用于腫瘤細胞形態(tài)學分析、細胞代謝分析、腫瘤藥物開發(fā)、原代腫瘤細胞庫建立等用途,還可用于單細胞蛋白組學分析、細胞表型分析、細胞免疫靶點分析等等。

 

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